Иммуногистохимия (ИГХ-анализ) молочной железы. Иммуногистохимическое исследование Иммуногистохимическое исследование рак мягких тканей

14.07.2020 Спорт

При подозрении на опухолевидное образование у пациента врач назначает ряд стандартных обследований.

Диагноз злокачественного поражения может быть выставлен только на основании оценки изменений в биоптате – иммуногистохимическое исследование (ИГХ) считается одним из самых достоверных способов обнаружения опухолевых клеток.

Что такое иммуногистохимическое исследование?

Суть иммуногистохимического исследования – это изучение под микроскопом образцов биологического материала, то есть тканей, полученных путем биопсии.

Предварительно ткани обрабатываются определенными специфическими антителами.

И сами раковые клетки являются объектами всестороннего исследования уже несколько десяток лет.

В ходе этих исследований ученым удалось установить, что опухолевидные клетки продуцируют специфические белки или как еще их называют – антигены.

Эти белки имеют способность связываться с антителами. Именно на этом и построен принцип ИГХ – забранная у пациента ткань для исследования обрабатывается рядом стандартных антител и проводится исследование под микроскопом.

Если антитела вступают во взаимодействие с раковыми клетками, то у них появляется свойство флуоресценции, то есть возникает свечение, отличающееся разной длиной волны. То есть если подобное изменение в исследуемом биоптате обнаружено, то можно уже с большей долей вероятности выставлять злокачественное образование.

На сегодня разработаны и активно используются антитела к большинству самых распространенных новообразований.

Иммуногистохимическое исследование позволяет:

  • Определить вид новообразования и его подвид.
  • Установить, насколько распространен по организму первичный раковый очаг.
  • Определить источник метастазов, если биоптат получен из вторичных очагов рака.
  • Оценить насколько эффективно проводимое лечение пациентов с онкозаболеваниями.
  • Установить стадию злокачественного новообразования.
  • Выяснить пролиферацию опухолей, то есть установить скорость роста новообразований.

ИГХ считается более информативным методом по сравнению с более привычным гистологическим. Но в некоторых случаях необходима именно гистология, поэтому желательно использовать оба анализа.

Показания

Метод ИГХ может применяться для исследования практически любых тканей в организме человека. Назначается этот вид исследования в основном, если имеется подозрение на развитие опухолевого процесса.

Иммуногистохимическое исследование используется:

  • Для определения типа первичных, в основном одиночных, новообразований.
  • Для выявления метастазов.
  • Когда необходимо определить прогноз развития и течения опухолей.
  • Как метод исследования рецепторов к ряду гормонов.
  • Для определения типа лимфопролиферативных состояний.
  • Для обнаружения микроорганизмов.

Противопоказаний к ИГХ нет. Этот анализ невозможно провести только в том случае, если возникают непреодолимые трудности при заборе образцов поврежденных тканей.

Как проводится анализ?

ИГХ проводится в несколько этапов, самый первый это долаборатоный, то есть забор тканей для анализа.

Образец получают путем биопсии, в некоторых случаях возможно отщипывание кусочка тканей или их изъятие при проведении эндоскопической или хирургической операции.

Как будет получен биологический материал, зависит от локализации новообразования и от его вида. Забранный материал помещают в формалин и только после этого направляют в лабораторный центр.

В лаборатории образец ткани подвергают нескольким изменениям:

  • Материал обезжиривают и заливают парафином. Таким образом, получаются гистологические блоки, хранить их можно вечно, поэтому и ИГХ можно при необходимости повторять.
  • Следующий этап микротомирование – получение тончайших срезов с шириной до 1,0 мкм с парафиновых блоков. Срезы распределяют на специальных стеклах.
  • Полученные срезы окрашиваются иммуногистохимическими препаратами, то есть растворами антител в определенной концентрации. Может использоваться для исследования малая панель – в нее входит 5 видов антител. Большая панель содержит от 6 и до десятков видов маркеров. Какие антитела будут вступать во взаимодействие с опухолевыми клетками, зависит от предполагаемого вида новообразования.

Результаты проведенного ИГХ становятся известны в течение 7-15 дней.

ИГХ при раке молочной железы

Для определения были выведены определенные иммуногистохимические маркеры. При подозрении на злокачественное образование обязательно количество таких рецепторов, как эстроген и прогестерон.

Избыток этих гормонов провоцирует рост злокачественного образования и влияет на появление метастаз. ИГХ на предмет экспрессии прогестеронов и эстрогенов позволяет точнее установить стадию заболевания и выяснить показано ли в этом случае гормональное лечение.

Опухоли с высокой концентрацией гормонов в большинстве своем не отличаются повышенной активностью и успешно лечатся антигормональными препаратами.

При проведении ИГХ обязательно определяют такой показатель, как Ki-67, он указывает на злокачественность процесса. Если при раке молочной железы Ki-67 доходит только до 15%, то исход болезни считается благоприятным.

При уровне в 30% говорят о быстрой скорости развития опухоли, прекращение ее роста происходит под влиянием химиотерапии. Если показатель меньше 30%, то лечение пациентов проводится гормональными средствами.

Обследование больных позволило установить, что если Ki-67 меньше 10%, то выживаемость приближается к отметке в 95%. При уровне этого показателя в 90% летальный исход наблюдается практически в ста процентах.

Иммуногистохимическое исследование назначается не только при злокачественном поражении молочной железы, это исследование оказывается информативным при:

  • Бесплодии.
  • Патологических изменениях в репродуктивной функции.

ИГХ эндометрия

Иммуногистохимическое исследование тканей эндометрия назначается:

  • При бесплодии.
  • При частом невынашивании беременности.
  • Пациенткам с несколькими неудачными попытками ЭКО.
  • При диагностике хронической формы эндометрия.

ИГХ позволяет установить имеются ли клетки, препятствующие зачатию. Этот анализ одновременно определяет, как реагируют рецепторы тканей матки на гормональную стимуляцию, если патология будет выявлена, то это указывает на изменения в эндометрии – эндометрит, гиперплазию, десинхронизацию процесса дифференцировки эндометрия.

Именно такие нарушения в двух случаях из трех становятся основными причинами проблем с зачатием и вынашиванием плода.

Забор тканей эндометрия в зависимости от выявляемой патологии проводится в разные дни цикла, день биопсии должен назначить врач. С помочью ИГХ можно установить раковые заболевания и инфицирование ВПЧ нескольких подвидов.

Расшифровка результатов

Исследует подготовленные образцы врач-патологоанатом, он должен иметь сертификат о специальной подготовке проведения анализов по методу ИГХ.

В заключение выносятся показатели антител, к которым определена тропность исследуемого материала.

Обязательно указывается морфологическая структура ткани, то есть вид атипичных клеток и их количество.

Выявление определенных антигенов указывает на вид раковой патологии. Но необходимо учитывать, что диагноз выставляется только на совокупности данных всех диагностических процедур. Интерпретировать результаты ИГХ может онколог.

Цена исследования

Стоимость иммуногистохимического исследования зависит от того, сколько антител используются при проведении анализа.

Стандартное исследование (от 2 и до 5 антител) в большинстве клиник стоит в пределах 4-5 тысяч рублей. Если выявляется сразу до десятка антигенов, то стоимость может быть гораздо выше — от 15 тысяч рублей.

Видео о том, как иммуногистохимия помогает поставить диагноз злокачественной опухоли:

Иммуногистохимическое (ИГХ) исследование представляет собой метод идентификации специфичных антигенных свойств злокачественных опухолей. используются для выявления локализации того или иного клеточного или тканевого компонента (антигена) in situ посредством связывания его с мечеными антителами и являются неотъемлемой частью современной диагностики рака, обеспечивая обнаружение локализации в тканях различных клеток, гормонов и их рецепторов, ферментов, иммуноглобулинов, компонентов клеток и отдельных генов.

Цели ИГХ исследования

ИГХ исследования позволяют:

1) осуществлять гистогенетическую диагностику опухолей;

2) определять нозологический вариант новообразования;

3) выявлять первичную опухоль по метастазу с неизвестным первичным очагом;

4) определять прогноз опухолевого заболевания;

5) определять злокачественную трансформацию клеток;

6) определять возможности ;

7) выявлять как резистентность, так и чувствительность опухолевых клеток к химиотерапевтическим препаратам;

8) определять чувствительность опухолевых клеток к лучевой терапии.

Как проводится ИГХ исследование?

ИГХ исследование начинается с забора материала. Для этого проводят , при которой производят забор столбика ткани из опухоли и близлежащих тканей, либо материал поступает с операции. Затем материал фиксируют. После фиксации материал отправляется в проводку, что позволяет подготовить его к работе (обезжирить и дополнительно фиксировать). После проводки все образцы заливают парафином, получая гистологические блоки. Парафиновые блоки хранятся вечно, поэтому провести исследование ИГХ можно при наличии парафиновых блоков, сделанных ранее.

Следующим этапом ИГХ исследования является микротомирование — лаборант делает срезы с парафиновых блоков толщиной до 1,0 мкм и помещает их на специальные гистологические стекла.

Затем производятся последовательно рутинная окраска и иммуногистохимическое исследование, позволяющие на каждом этапе все более и более дифференцировать фенотип и нозологию опухоли.

Как видно, ИГХ исследование представляет собой сложный многоступенчатый процесс, и поэтому для проведения ИГХ исследования следует выбирать самую современную лабораторию с высококвалифицированными специалистами и высокой долей автоматизации — так Вы сведете на нет риски получения некачественной диагностики. Такой лабораторией на сегодняшний день является ЮНИМ.

Отдельно следует сказать о сроках проведения данного исследования. В среднем по России, ИГХ исследование производится в сроки от 10 дней до нескольких недель. При обращении в ЮНИМ Вы можете сделать исследование ИГХ всего за 3 дня! Также преимуществом проведения ИГХ исследования в ЮНИМе является Ваших материалов на исследование из любого города России. При необходимости стоимость уточняйте, подав заявку на исследование, либо звоните по горячей линии (бесплатно по России): 8 800 555 92 67 .

Метод определения Гистологическое исследование биоптата согласно гистологической классификации Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) с окрашиванием гематоксилином-эозином. ИГХ-исследование с применением спектра тканеспецифичных и прогностических антител (до пяти антител) (пероксидазный и авидин-биотиновый методы).

Исследуемый материал Смотрите в описании

Доступен выезд на дом

Комплексное исследование биоптатов метастатических образований различных локализаций, включающее морфологическое описание и оценку экспрессии спектра тканевых маркеров, для определения гистогенеза первичного опухолевого очага.

По статистике, в 3-15% случаев злокачественные опухоли манифестируют метастазами. Метастазы без выявленного первичного очага характеризуются случайной, нетипичной локализацией и быстрым прогрессированием процесса. Средняя продолжительность жизни пациентов с тремя и более метастатическими очагами поражения составляет три месяца. При этом локализация первичного очага у 60-70% пациентов выявляется только на аутопсии. Своевременная ИГХ-диагностика определяет тактику лечения до выявления первичного очага.

Патоморфологическая диагностика метастазов невыявленных опухолей предусматривает определение их морфологического типа, уточнение вероятного источника метастазирования, оценку злокачественного потенциала. Первая задача решается при рутинном гистологическом исследовании биопсийного материала (окрашивание гематоксилином-эозином), вторая - применением специальных методов исследования: гистохимического, иммуногистохимического (ИГХ) или молекулярно-генетического метода FISH (Fluorescence In Situ Hybridization).

При рутинной морфологической диагностике метастатические опухоли, согласно рекомендациям Европейского общества медицинской онкологии ESMO (European Society for Medical Oncology) (2004), разделяются на пять крупных категорий: аденокарцинома, плоскоклеточный рак, нейроэндокринный рак, недифференцированный рак, недифференцированная опухоль. Эти морфологические категории, наряду с данными о распространенности процесса, во многих случаях позволяют определить адекватный план обследования (и лечения). Так, например, при выявлении метастаза плоскоклеточного рака в шейных лимфатических узлах необходимо эндоскопическое обследования органов верхних дыхательных и пищеварительных путей. ИГХ-исследование, в зависимости от морфологического типа новообразования, позволяет уточнить гистогенез опухоли и/или определить вероятную локализацию первичного очага.

Для ИГХ-исследования первичных опухолей и их метастазов используется широкий спектр тканеспецифичных маркеров: -цитоспецифичные (кластеры дифференцировки лейкоцитов (CD – Clusters of Differentiation), гладкомышечный актин, миоглобин, тиреоглобулин); -маркеры пролиферации (Ki67, PCNA – Proliferating Cell Nuclear Antigen); -опухолевые маркеры – онкофетальные антигены (фетопротеин, карциноэмбриональный антиген); -гормоны (эстроген, прогестерон); -ферменты, белковые продукты клеточных онкогенов и др.

Единых алгоритмов при ИГХ-исследовании метастазов опухолей без уточненного первичного очага не разработано. Корректное определение направления дифференцировки опухолевых клеток и ряда биологических параметров опухоли само по себе является показанием для назначения определенных схем терапии. Например, обнаружение метастазов аденокарциномы в лимфоузлах подмышечной области может являться показанием к проведению терапии, аналогичной терапии рака молочной железы соответствующей стадии. Обнаружение экспрессии рецепторов эстрогенов и прогестерона в такой аденокарциноме может стать показанием к назначению антигормональной терапии вне зависимости от наличия определяемого опухолевого узла в молочной железе. Пример алгоритма, рекомендуемого для использования в дифференциальной диагностике.

Материал для исследования: биоптат опухоли, фиксированный в парафиновом блоке.

Литература

  1. Blaszyk H., Hartmann A., Bjornsson J. Cancer of unknown primary: clinicopathologic correlations. APMIS. 2003;111(12):1089-1094.
  2. Dabbs D.J. Diagnostic Immunohistochemistry: Theranostic and Genomic Applications. Elsevier, 4-th Edition. 2013:960.
  3. Di Patre P.L., Carter D. Sternberg"s Diagnostic Surgical Pathology Review. Wolters Kluver, 2-nd Edition. 2015:488.
  4. Dietal M., Wittekind С., Bussolati G., von Winterfeld М. Pre-Analytics of Pathological Specimens in Oncology. Sрringer. 2015:133.
  5. Dodd L.G, Bui M.М. Atlas of Soft Tissue and Bone Pathology. DemosMEDICAL. 2014:720.
  6. Edge S.B, Byrd D.R., Compton C.C., Fritz A.G., Greene F.L., Trotti A. AJCC Cancer Staging Manual. Sрringer, 7-th Edition. 2011:646.
  7. Elder D.E. Lever"s Histopathology of the Skin. Wolters Kluver, 11-th Edition. 2014:1544.
  8. Epstein J., Netto G. Biopsy Interpretation of the Prostate. Lippincott Williams and Wilkins, 5-th Edition. 2014:450.
  9. Erickson L. Atlas of Endocrine Pathology. Sрringer, 1-st Edition. 2014:178.
  10. ESMO Minimum Clinical Recommendations for diagnosis, treatment and follow-up of cancers of unknown primary site. Annals of Oncology. 2005;16(S.1):175-176.
  11. Fletcher C.D.M., Bridge J.A., Hogendoorn P., Mertens F. WHO Classification of Tumours of Soft Tissue and Bone. WHO Press, 4-th Edition. 2013;5:427.
  12. Kurman R.J., Carcangiu M.L., Herrington C.S., Young R.H. WHO Classification of Tumours of the Female Reproductive Organs. WHO Press, 4-th Edition. 2014;4:316.
  13. Louis D.N., Ohgaki H., Wiestler O.D., Cavenee W.K. WHO Classification of Tumours of the Central Nervous System. WHO Press, 4-th Edition. 2007;1:312.
  14. Malpica A., Euscher Е.D. Biopsy Interpretation of the Uterine Cervix and Corpus. Wolters Kluver, 2-nd Edition. 2015:368.
  15. Nishizuka S., Chen S.T., Gwadry F. et al. Diagnostic markers that distinguish colon and ovarian adenocarcinomas: identification by genomic, proteomic, and tissue array profiling. Cancer Research. 2003;63:5243-5250.
  16. Nordi Q.C. http://www.nordiqc.org.

Стандартизованное иммуногистохимическое исследование: рецепторный статус при раке молочной железы (PR, ER, ki67, Her2 neu). Выполняется только при наличии готового микропрепарата на предметном стекле и образца ткани в парафиновом блоке.

Синонимы русские

ИГХ-исследование (РЭ, РП, Her2/neu, Ki-67), иммуногистохимический анализ рецепторного статуса рака молочной железы.

Синонимы английские

IHC (ImmunoHistoChemistry) Test for Breast Cancer Receptor Status (ER, PR, HER2, Ki67), HER2 Overexpression by IHC, Estrogen Receptors, Progesterone Receptors, ER and PR Status, Estrogen and Progesterone Receptor Status.

Метод исследования

Иммуногистохимический метод.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Парафиновый блок с биоптатом образования молочной железы. Ткань первичной опухоли может быть получена с помощью толстоигольной биопсии, а также инцизионных и эксцизионных хирургических вмешательств. Для выявления метастазов на биопсию могут быть взяты ткани из стенки грудной клетки, регионарных лимфоузлов или отдаленных органов.

Общая информация об исследовании

Современные принципы и стратегии лечения рака молочной железы основываются, в том числе, на результатах оценки рецепторного статуса и пролиферативного потенциала опухолевых клеток. Клетки опухоли обладают способностью вырабатывать и располагать на своей поверхности специальные белки – рецепторы, стимуляция которых приводит к запуску клеточного деления и росту опухоли. Подобные рецепторы способны связываться с веществами, присутствующими в организме в норме и исходно никак не связанными с развитием злокачественного новообразования. Согласно актуальным клиническим рекомендациям, для рака молочной железы имеет значение наличие на опухолевых клетках следующих рецепторов, различные комбинации которых называются рецепторным статусом:

    Рецепторы к гормонам – эстрогенам и прогестерону (ER, PR ). Значительная часть опухолей молочной железы является гормонально-зависимыми, то есть их рост поддерживается и стимулируется эстрогенами и прогестероном. Опухоли с положительным гормональным рецепторным статусом хорошо отвечают на терапию аналогами гормонов (тамоксифен), которые блокируют соответствующие рецепторы – связываются с ними, но не вызывают активации внутриклеточных процессов и не дают рецептору впоследствии связаться с гормоном. Таким образом, исследование продукции опухолью ER и PR позволяет определить ее чувствительность к этим препаратам.

    Рецептор второго типа к человеческому эпидермальному фактору роста (human epidermal growth factor receptor 2 – HER2/neu ). В клетках некоторых опухолей молочной железы имеет место повышенная выработка данного рецепторного белка, который, соединяясь с естественным фактором роста, запускает в опухолевой клетке процесс деления. Общее число пациенток с HER2-положительным раком молочной железы составляет от 15% до 20%. Определение HER2/neu имеет не только прогностическое значение (такие опухоли обычно прогрессируют быстрее и имеют более агрессивное клиническое развитие), но и позволяет оценить возможность применения таргетных лекарственных препаратов – моноклональных антител к рецептору HER2 – трастузумаб (герцептин), лапатиниб, пертузумаб. Кроме того, HER2-позитивные опухоли резистентны к тамоксифену.

Пролиферативная активность – показатель способности опухолевых клеток к неограниченному делению, которое является основным фактором биологической агрессивности опухоли. Процесс деления сопровождается появлением в клетке определенных белков, один из которых – Ki-67 . Он не продуцируется в клетках в состоянии покоя, что позволяет использовать его как маркер пролиферативной активности опухоли. Определение уровня Ki-67 имеет важное прогностическое значение, так как наибольшей пролиферативной активностью обладают опухоли из наименее зрелых и дифференцированных клеток.

Все указанные выше маркеры могут быть выявлены при иммуногистохимическом исследовании биоптата или операционного материала опухоли. Для анализа из готового парафинового блока с помощью специального микроножа нарезают тончайшие срезы, которые затем прикрепляют к предметным стеклам и красят рутинными красителями, чтобы было возможно отличить клетки друг от друга и от межклеточного вещества. Затем срезы на стеклах окрашиваются растворами антител, меченных флюоресцирующими метками, специфичных к одному из исследуемых рецепторов. Если в опухолевой клетке присутствует искомый рецептор, антитела связываются с ним и при просмотре стекла под специальным микроскопом можно увидеть флюоресценцию, что будет свидетельствовать о положительном результате теста. Кроме того, при просмотре среза врач-морфолог сможет увидеть, что окрашенный маркер располагается в ядре, клеточном веществе или на оболочке опухолевых клеток. Количество применяемых растворов с антителами соответствует количеству маркеров, которые исследуются в образце. Степень флюоресценции и процент клеток, в которых она есть, лежат в основе интерпретации результатов иммуногистохимического анализа и подробнее описаны в соответствующем разделе.

Для чего используется исследование?

  • Для определения гормонорецепторного статуса и степени пролиферативной активности рака молочной железы для оценки прогноза и индивидуализации лечения, в том числе определения показаний для назначения таргетной терапии.
  • По результатам детекции гормональных рецепторов определяется целесообразность использования антиэстрогенов, а рецептора HER2 – таргетных анти-HER2 препаратов. Выявленное отсутствие этих маркеров позволяет избежать назначения заведомо неэффективной терапии. Высокий индекс пролиферативной активности, а также негативность по рецепторному статусу по большей части являются показанием для добавления к лечению цитостатических препаратов.

Когда назначается исследование?

  • При наличии гистологически верифицированного рака молочной железы - впервые выявленные, рецидивирующие и метастатические опухоли.

Что означают результаты?

При интерпретации результатов иммуногистохимического определения рецепторного статуса стероидных гормонов (эстрогенов и прогестерона) в опухолях молочной железы следует оценивать не только процент окрашенных антителами клеток, но и интенсивность окрашивания. Оба эти параметра учитываются в шкале Allred, где процент позитивных клеток оценивается от 0 до 5 баллов, а интенсивность окрашивания от 0 до 3. Сумма двух показателей является итоговым баллом, по которому определяется позитивность опухоли по рецепторному статусу: 0-2 негативная, 3-8 позитивная. Общий балл 3 по этой шкале соответствует 1-10% окрашенных клеток и является минимальным позитивным результатом, когда назначение гормональной терапии может иметь эффективность.

Иногда рецепторный статус определяется исключительно по проценту клеток с окрашенными ядрами. В таких случаях NCCN рекомендует считать позитивными все опухоли, где есть более 1% позитивных клеток.

При интерпретации окраски на рецептор HER2/ neu учитывают только мембранное окрашивание (окрашивание клеточной оболочки), которое оценивают по шкале от 0 до +3:

    результат 0 и +1 считается HER2-негативным;

    2 – пограничный результат, при нем по данным иммуногистохимического исследования нельзя судить о наличии на поверхности клеток рецептора HER2-neu, необходимо проведение FISH- или CISH-исследования;

    3 – положительный результат – таргетная терапия анти-HER2 препаратами будет эффективна.

Согласно классификации St. Gallen Consensus (2009), низким индексом пролиферативной активности считается уровень Ki-67 менее 15%, средним – 16-30%, а высоким – более 30%.

Что может влиять на результат?

  • Качество предоставленных парафиновых блоков, опыт и квалификация врача-патоморфолога, так как иммуногистохимический метод не в полной мере стандартизирован и оценка его результатов в некоторой степени субъективна.
  • Интерпретация результатов исследования должна проводиться исключительно врачом соответствующей специальности, приведенные данные об эффективности и целесообразности назначения определенных лекарственных средств в зависимости от результатов исследования носят исключительно рекомендательный характер и могут быть пересмотрены с учетом индивидуальных особенностей пациентки.


Важные замечания

  • При неопределенном HER2/neu-рецепторном статусе (результат иммуногистохимического исследования 2+) рекомендуется выполнение FISH- или CISH-исследования, которые позволят выявить гиперактивацию гена, кодирующего этот рецептор. При недоступности этих исследований допускается повторное иммуногистохимическое исследование, но на другом образце опухолевой ткани.
  • Существует несколько шкал оценки рецепторного статуса рака молочной железы, в лабораторном отчете должно быть указано, по какой именно проводилась оценка позитивности опухоли в данном исследовании, а также дана описательная характеристика количества позитивных клеток, особенностей окрашивания клеточных структур и морфологических особенностей клеток.

    Гистологическое исследование биопсийного материала образования молочной железы

    Цитологическое исследование пунктатов молочной железы

    Определение HER2 статуса опухоли методом FISH

    Определение HER2 статуса опухоли методом CISH

Кто назначает исследование?

Онколог, маммолог, онкогинеколог.

Литература

    Dana Carmen Zaha. Significance of immunohistochemistry in breast cancer. World Journal of Clinical Oncology, 2014; 5(3): 382-392.

    NCCN Clinical Practice Guidelines in Oncology: Breast Cancer. Version 3.2017 – November 10, 2017. Available at www.nccn.org.

    Клиническая лабораторная диагностика: национальное руководство: в 2 т. – T. I / Под ред. В. В. Долгова, В. В. Меньшикова. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2012. С. 658-660.

    В. Ф. Семиглазов, Р. М. Палтуев, В. В. Семиглазов, Г. А. Дашян, Т. Ю. Семиглазова, П. В. Криворотько, К. С. Николаев. Общие рекомендации по лечению раннего рака молочной железы St. Galle- 2015, адаптированные экспертами Российского общества онкомаммологов. Опухоли женской репродуктивной системы, 2015; 3: 43-60.

Альтернативные названия: ИГХ, англ.: Immunohistochemistry или IHC.


Иммуногистохимическое исследование - особый метод диагностики опухолевых заболеваний. Суть метода заключается в изучении под микроскопом образов тканей, предварительно обработанных специфическими антителами.


Опухолевые клетки продуцируют специфические белки (антигены), которые способны связываться с определенными антителами. Во время проведения ИГХ образец ткани обрабатывается различными стандартными антителами, а затем исследуется под микроскопом. Антитела, связанные опухолевыми клетками обладают свойством флуоресценции – способностью светиться под лучами с определенной длиной волны. Это свечение и позволяет определить раковые клетки.


В настоящее время созданы антитела практически ко всем опухолям.

С помощью иммуногистохимического исследования выполняется:

  • определение вида и подвида опухоли;
  • определение распространенности онкологического очага;
  • при исследовании метастазов определяется их источник;
  • оценка эффективности лечения онкозаболеваний;
  • определение степени злокачественности опухоли;
  • выясняется пролиферативная активность опухолей (с какой скоростью они растут).

Показания для иммуногистохимического исследования

С помощью этого метода можно исследовать любые ткани. Главным показанием к проведению является подозрение на опухолевый процесс.

Определены следующие показания для ИГХ:

  • иммунофенотипирование первичных солидных (одиночных) опухолей;
  • иммунофенотипирование метастазов;
  • определение прогноза исхода опухолевого процесса;
  • исследование рецепторов к различным гормонам;
  • иммунофенотипирование лимфопролиферативных состояний;
  • определение микроорганизмов.

Противопоказания

К данному методу исследований нет противопоказаний. Его проведение невозможно лишь в том случае, если нет возможности получить биопсийный материал.

Как проводится иммуногистохимическое исследование

Само исследование состоит из четырех этапов:

  1. Долабораторный этап, заключающийся в получении адекватного образца ткани для анализа. Ткань для исследования может быть получена с помощью инцизионной или эксцизионной биопсии, punch-biopsy (с помощью щипцов) или же в ходе эндоскопической операции. Процедура получения биоптата, а также подготовка к ней, определяются видом и локализацией опухоли. Полученную ткань помещают в 10% раствор формалина и отправляют в лабораторию.
  2. Подготовка, в ходе которой производится обработка биоптата с последующим первичным его изучением. На этом же этапе из кусочка ткани готовят тончайшие срезы.
  3. Окрашивание срезов иммуногистохимическими препаратами, представляющими собой раствор специфических антител. В зависимости от того сколько различных типов антител использую, выделяют малую и большую панели исследования. В малую панель входит до 5 антител, в большую – от 6 и до нескольких десятков. Количество определяемых маркеров зависит от предполагаемого диагноза.
  4. Исследование и анализ окрашенных образцов, после которого выносится заключение.

Результаты исследования становятся известны через 7 дней (при стандартном исследовании – «малая панель») или через 15 (расширенное исследование – «большая панель»).

Интерпретация результатов


Изучением образцов занимается врач-патологоанатом, прошедший специальную подготовку по ИГХ. В заключении врач отмечает, к каким антителам определена тропность (сродство) ткани. Дополнительно описывается морфологическая структура образца – какие клетки и в каком количестве присутствуют.


Выявление сродства ткани к определенным стандартным опухолевым антителам свидетельствует о конкретном виде онкологического заболевания.

Дополнительная информация

Иммуногистохимическое исследование в настоящее время является наиболее точным методом диагностики опухолевых заболеваний. Оно позволяет с точностью до 99% поставить окончательный диагноз, определить вид опухоли, выявить ее первичную локализацию.

Литература:

  1. Проект приказа Минздрава России от 21 ноября 2012 г. «Об утверждении Порядка оказания медицинской помощи по профилю «патологическая анатомия»
  2. Иммуногистохимические методы: руководство. Пер. с англ. под ред. Г.А. Франка и П.Г. Малькова // М., 2011, – 224 с.