Ni vse, kar je pri roki, je smiselno dati na predmet mize in poskušati razmisliti v okularju mikroskopa. Na primer, neprozorni predmeti (prst, kovanec) sploh ne bodo upoštevali, in obstaja precej močno povečevalno steklo.

Običajno se za mikroskope uporabljajo posebej pripravljeni mikroskopi. Pri pripravi mikroparacije se vzamete predmetno steklo (velikost 25 × 75 mm), ki je postavljena zadevni predmet; Običajno je za boljšo varnost in enostavnost uporabe, je predmet prekrit s tanko prevleko steklo (velikost 18 × 18 mm).

Z načinom kuhanja in skladiščenja se razlikuje:

• trajne droge - objekt je nameščen v preglednem okolju utrjevanja (običajno kanadski balzam) in pokrovi s premazom stekla; Takšna zdravila se lahko shranijo že več let in desetletij, vendar je njihova priprava precej težavna (predmet je treba skrbno pripraviti: dehidrirano, pobarvano itd.);
• začasna zdravila - objekt je nameščen v tekočem mediju (voda, slanica, glicerin-želatina itd.), Takšna zdravila so primerna za uporabo več ur, vendar se lahko poskusi izvedejo z njimi (na primer, da nadomestijo vodo z Solna raztopina določene koncentracije, dodamo barvilo itd.).

Stalno zdravilo

Tabela prikazuje vrste pripravkov, odvisno od narave predmeta v študiji.

		Opis	Trajno / začasno	Primer
	Skupna priprava	Celoten organizem ali njegovi majhni deli (ude, ustni aparat). Ponavadi zahtevajo predelavo (pojasnilo)	Stalno, začasno
		Objekt se vlije v plastični material (parafin, akril) in po strjevanju je narezan na tanke plošče z mikrotomom (naprave za izdelavo tankih odsekov)	Ponavadi stoji
		Priprava trenutnega sloja brez prevlečnega stekla (ponavadi krvni izdelek): kapljica s poliranim steklom je razmazana na površini diapozitnega stekla, posušenega	Začasno, manj pogosto
		Tanek (debelina 0,03-0,02 mm) plošča skale ali drugega trdnega vzorca (kosti, fosilna), prilepljena na pokrivno steklo	Konstanta

V nekaterih primerih se začasni pripravek lahko ogledate neposredno brez pokrivanja stekla. To zdravilo bo skoraj nemogoče razmišljati dramatično vse - nekateri del bo v središču pozornosti, ostalo pa ni. Ampak, če upoštevamo takšno zdravilo z majhnim povečanjem mikroskopa, lahko razmislite o nekaterih zanimivih objektih.

Tudi v obliki odprtega časa je možno gojiti kristale različnih soli (acetilsalicilna kislina ali aspirin, bakrorski sulfat, ali bakreni sulfat; rdeče krvne soli ali kalijev heksacijski sanoferate). Nekaj \u200b\u200bkapljic vodne ali alkoholne raztopine soli se nanesejo na prah in prstnih odtisov s prstom (za boljše kakovosti kristalov, raztopina je prednostna, ker bo zmanjšala število kristalizacijskih točk in dobili večje in urejene kristale). Kapljice se lahko posušijo (možno je izvesti eksperiment z enim od kozarcev, ogrevati ga, da bi pospešili izhlapevanje, in drugega, da izhlapi topilo, kristali pa se spustijo neodvisno). Prav tako lahko razmislite o polpripravljenem mikro-proces na procesu kristalizacije: vidite lahko, kako se kristal povečuje neposredno v oči ali kako se pretok tekočine pojavi okoli zarodka trdne snovi zaradi razlike v koncentracijah ionov.

Preprost in spektakularen način izdelave mikrofretov brez kosov, ki omogočajo razmisliti o lajšanju površine preučevanega predmeta (na primer list rastlin, teles insektov) - metoda replika. Hkrati je predmet (na primer, na primer list rastline), za to je na voljo tanek sloj prozornega laka za nohte (dovolj majhnih točk 5 × 10 mm). Ko se lak suši (po približno 5-7 minutah), je kos lepljivega traku prilepljen na lak madež; Torej je replika ločena, potem pa se postavi na diapozitiv in gleda pod mikroskopom.

1.1. Priprava začasnega pripravka

Tehnika priprave začasne droge je znana za šolske eksperimente s kožo pokrova. Postavimo stekleno steklo na mizo (droge se vedno hranijo za stranskim obrazom predmeta stekla). V središču kozarca smo postavili 1-2 kapljice vode in predmet študije je na pokrovnem steklu za stranske plošče in jih previdno pokrijte od nad padcem s predmetom. Bolj pravilna je, da prehitete pokrivno steklo enega od obrazov v predmet in počasi zmanjšate kot med kozarci, da pokrijete spusti z objektom. To zmanjšuje možnost zračnih mehurčkov.

1.2. Kuhanje krvi

Krvna krvna preskus krvi se pripravijo na naslednji način.

Korak	Opis	Fotografija
	Postavite majhno kapljico krvi na vodoravno površino poravnalnega stekla, s stekleno kapilarno pipeto (ali neposredno iz točke prstnega mesta, prenesite kapljico krvi na konec sterilnega drsnega stekla, ki se ne boste dotaknili stekla z punktirana koža).
	Čisto brusilno steklo je nameščeno s kratkim robom pod kotom 45 ° do predmeta stekla na robu padca. Čakamo, dokler kri ne zameglje pod rob stekla.
	Takoj, ko se krva razprostira čez rob, porabijo hitro gibanje iz kapljic vzdolž predmetnega stekla. Ne sme se močno pritisniti na steklo, saj lahko enotni elementi krvi porušijo.
	Po kuhanju se razmaza hitro posušimo v zraku, dokler se mokri sijaj ne izgine, ga držimo nad svetilko svetilke nad žarnico ali jo mahate v zraku. Dobro izdelan razmaza iz tanke barve, ima rumenkasto barvo in se konča z "pitcle". Zaradi rožnatih in rdečkastih udarcev so neprimerne, saj so predebežne in celične elemente bodo težko razlikovati.

Slike in opis iz microtome.info/documents/micropreparati.html.

2. Nekatere značilnosti mikroskopacije

Uporaba mikroskopov na majhni in veliki povečavi je precej znana po šolskih eksperimentih in ne zahteva posebej zapletenih veščin.

2.1. Mimenzionalna leča

Če je potopni mikroskop z potopnim objektivom (označeno je s 100 × MI in črnim obročem, in ima premični del leče do mikrokriranja), potem imate možnost, da preučite predmete z velikim povečanjem (vendar , je smiselno uporabiti poteze).

Postopek za delo z lečo potopitve nafte je naslednji.

1. Iz žarkov iz žarkov (obrnite objektivni boben, da se v zdravilo ne obrne na zdravilo).
2. Za zdravilo nanesite eno kapljico potopnega (cedre) olja; Prednostno potopno olje je tudi malo mazanje leče tega leča.
3. Vrnitev bobna objektiva, vnesite potopni objektiv na žarke (preden kliknete pritrditev).
4. Spustite objektiv, da se obrnite na EM dimenzionalni olje, nato pa gledate mikroskop, z grobimi in finimi vijaki ostrenja, nastavite ostrino.

Pri delu z potopnim lečo bo potrebna največja osvetlitev. Po koncu študije je treba potapljanje obrisati z mehko optično krpo ali palico, rahlo navlažemo s posebno tekočino za čiščenje optike. Pomembno: Vse druge vrste objektivov ne morejo biti obrišene!

Aplikacija namesto cedre nafte drugih oljnih tekočin, ni priporočljivo, saj, če se lomni indeks potopitve uporablja (na primer vazelin olje z indikatorjem 1.48162) razlikuje od refraktivnega indeksa cedrovega olja (indikator 1.515) , mogoče je zmanjšati kontrast, zaročljivost slike, zmanjšanje ločljivosti.

2.2. Fotografije v Braid Razsvetljava in temno polje

Za pripravke v razsutem stanju (skupna žuželka, alga, itd.) Je zanimiva za uporabo razsvetljave, ki ni običajna prosojna. Za nastavitev razsvetljave v mikroskopih se kondenzator uporablja - rotacijska naprava z luknjami različnih premerov in lokacije. Z uporabo posebnih možnosti za kondenzacijo lahko spremenite naravo osvetlitve zdravila, s poudarkom na obsegu obravnavanega predmeta.

Tabela primerja delo z razsvetljavo različnih vrst.

	Vrsta osvetlitve	Metoda ustvarjanja	Pogled na učenca leče z eholarjem	Primer
	Normalno (prosojno)	Svetloba skozi vse enakomerno pogleda skozi polje.

1) Začasni pripravki

Če želite preučiti zelenjavne predmete z lahkim mikroskopom, morate pripraviti mikrofrekvenčni postopek. Mikropreparations, ki niso namenjeni za dolgoročno skladiščenje, se imenujejo začasno. Preučen predmet je nameščen na drsniku v kapljici vode, glicerola, raztopine, reagenta ali barvila in prekrit s prevleko stekla. Takšna zdravila se lahko shranijo več dni z dajanjem v mokro atmosfero.

2) Stalna zdravila

Za posebne tehnike, ki zagotavljajo njihovo skladiščenje že desetletja, so pripravljene trajne droge. Stalne pripravke vključujejo poteze, skupna zdravila in odseke. Poroki se uporabljajo v študiji krvnih celic, pridelkov mikroorganizmov, izoliranih tkivnih celic. Skupni pripravki so ločeni pregledni in tanki predmeti. Oddelki za usposabljanje se lahko izvede ročno z uporabo britvice. Vendar pa so visokokakovostni odseki z določeno debelino 10 ... 22 mikrometrov običajno izdelane s posebnimi napravami - mikrotomi. Takšni deli se pogosto imenujejo mikrotomična zdravila. Za več subtilnih kosov (0,01 ... 0,05 μm, ali 10 ... 50 nanometrov) uporabljajo ultramicrotomes.

Na kratko upoštevajte glavne faze priprave trajnih drog.

1. Pritrditev materiala. Takoj po koncu fiksiranja, pranje materiala ali vode (po vodah), ali80% alkohola (po ključavnicah alkohola). Število sprememb v pralnih tekočinah - vsaj 3. Čas - do 24 ur.

2. Dehidracija v alkoholih povečanja koncentracije. Vzporedno se pojavi materialni tesnilo. Zaporedna gibanja materiala s številnimi raztopinami se imenuje ožičenje. Po vodnih sponkah se uporabljajo 8 alkoholnih izmenov: 20%, 40%, 80%, dva izmenasa 96%, dva izmenasa 100%. Po alkoholu Ključavnice - 4 Alkohol izmeni: dva izmeta 96% in dva izmenah 100%. V vsaki premik se material ohranja pri 1 uri.

3. Razsvetljenje. Material impregnira s solventom parafina-ksilena (benzen, kloroform). Vzorec se postavi na 1 uro v seriji v vsaki od naslednjih rešitev: 3 dele alkohola + 1 del ksilena, nato 2 dela alkohola + 2 delih ksilena, nato 1 del alkohola + 3 delov Xylene, Potem dva izmeta ksilena.

4. Nalivanje parafina. To je nadomestitev ksilena parafina. Vzorec je nameščen v mešanico ksilena in parafina pri temperaturi 55 ... 57 stopinj in dopust v termostatu pri tej temperaturi, da popolnoma izhlapevanje ksilena (od nekaj ur do več dni). Nato pri temperaturi 55 ... 57 stopinj, ožičenje skozi parafin I (6 ... 12 ur), parafin II (6 ... 12 ur) in nalivanje na parafin III. Parafini I, II, III se razlikujejo samo v čistosti: Parafin III je zadnji medij, ki bi moral imeti največjo čistočo. Posledica tega je, da se parafinski bloki dosežejo, v katerih se sklenejo vzorci materiala. Ti bloki se lahko razrežejo v katero koli smer.

5. Odseki obarvanja. Parafinski odseki so prilepljeni za čiščenje stekla. Kot lepilo se lahko zmes beljakovin piščančjega jajca z glicerolom (v razmerju 1: 2) uporablja z dodatkom antiseptičnega (timola ali fenola). Običajno proizvajajo razdelke. Za to se steklo z glitched cuts izvaja skozi ksilena, zmanjšanje koncentracijskih alkoholov (100%, 96%, 80%, 70%) in destilirano vodo. Reči čas v vsakem okolju - 2 ... 3 minute. Naslednji so pobarvani glede na metode.

6. Dehidracija in razsvetljenje poslikanih kosov. Opravlja se z ožičenjem skozi alkohole povečevanja koncentracije, nato pa preko ksilena.

7. Zaključek v sredo (nalivanje). Za dolgoročno skladiščenje zdravil, jih je treba zaključiti v sredo, ki ščitijo drogo od zraka oksidacije in od škode na glivah. Posebne smole se uporabljajo za polnjenje (kanadski balzam, fire Balsam), ki se raztopijo v ksilenu do konsistence tekočega medu. Za rezanje in pokrov s premazom stekla se nanese kapljica take raztopine.

6. Kemična sestava celične snovi. Micro in Macroelments.

V sestavi celice je bilo ugotovljenih več kot 80 kemičnih elementov, kakršne koli stroge elemente, značilnosti samo živih organizmov, niso bile zaznane. Vendar pa je le v zvezi s 27 točkami znane, katere funkcije izvajajo. Preostalih 53 elementov bo verjetno pade v telo iz zunanjega okolja.

1. Macroelements.

Predstavljajo večino celične snovi. Predstavljajo približno 99% mase celotne celice. Še posebej visoka koncentracija štirih elementov: kisik (65-75%), ogljik (15-18%), dušik (1,5-3%) in vodik (8-10%). Makroelements vključujejo tudi elemente, katerih vsebina v celici se izračuna z desetimi in stotin odstotkov. To je na primer kalij, magnezij, fosfor, žveplo, železo, klor, natrij.

2. Mikroelements za njih vključujejo predvsem atome kovin, ki so del encimov, hormonov in

druge vitalne snovi. V telesu so ti elementi vsebovani v zelo majhnih količinah: od 0,001 do 0,000001%; Obstajajo med tistimi elementi Bor, Kobalt, baker, molibden, cink, jod, brom itd.

3. Ultramicroelements.

Koncentracija njih ne presega 0,000001%. Med njimi so urani, radij, zlato, živo srebro, berilij, cezij in drugi redki elementi. Fiziološka vloga večine teh elementov v organizmih rastlin, živali, gliv in bakterij še ni bila ugotovljena.

Ministrstvo za šolstvo in znanost Ruske federacije

Državna izobraževalna ustanova višje strokovno izobraževanje

"Shadrin State Pedagoški inštitut"

Oddelek za naravne discipline z metodo poučevanja

Metode za pripravo mikrofrantov na biologijo

Delo tečaja

posebnost 050102 "Biologija"

Izvajalec:

Gorshkova ekaterina andreevna.

Študent 3 Oddelek za dan tečaja

Znanstveni svetovalec:

Kandidat bioloških znanosti, izrednega profesorja

Sharypova Nadezhda Vladimirovna.

_________________________________

Vrednotenje __________________________

Shadrinsk.

2014

Uvod ....................................................... ................................... .3.

§ 1. Značilnosti mikrospeščin in njihove uporabe ..................... .4

§ 2. Oprema, potrebna za pripravo mikro-popravila ...... .7

§ 3. Priprava materiala za pripravo mikro-popravil ............ ... 12

§ 4. Metode za pripravo mikro-popravila ....................................17

Zaključek ..................................................... ................................ 31.

Bibliografski seznam ................................................ ............32.

Dodatek ......................................................... ........................................... ... 34.

Uvod

Ustreznost raziskovalne teme. Mikro-predelava so orodje vizualnega učenja, zato se bodo v laboratorijskih razredih pogosto uporabljali v izkušnjah o biologiji, pri preučevanju novih materialov, posplošitev, primerjave in raziskavah.

Zaradi nezadostnega zagotavljanja bioloških omaric s pripravljenim mikrorozitom, ki so potrebni za boljšo študijo subjekta, se lahko izvedejo neodvisno.

Na podlagi pomembnosti smo izbrali naslednjo raziskovalno temo: "Metode za pripravo biologije mikrokraparacije".

Raziskave predmeta so mikrorike.

Stvar - Metode priprave mikrokratov.

Namen študije: Preučiti vrste mikropreprav za biologijo in njihove metode priprave.

Raziskovalne naloge:

1. Preučiti in analizirati literaturo na to temo.
2. Izvedite značilnost mikrokracije in nasvetov na njihovo uporabo v lekcijah o biologiji.
3. Opišite opremo, potrebno za pripravo mikro-obdelave.
4. Naučite se pripraviti material za pripravo mikrokratov.
5. Preglejte metode za izdelavo mikrokratov.

Za izvajanje ciljev in nalog se uporablja naslednjeraziskovalne metode: Analiza znanstvene in metodološke literature na temo raziskav, pilotov iskanje in povzema svoje rezultate.

Struktura seveda. Tečaj je sestavljen iz uvedbe, 4 odstavkov in zapor, je predstavljen bibliografski seznam, vključno s 16 virov, 1 aplikacijami.

§ 1. Mikropreparativne značilnosti in njihova uporaba

Naravne razpršene ugodnosti vključujejo herbarij, mokre pripravke, mikrospekcije.

Mikroprodukt je tanek del organa živega organizma ali mikrodelk, ki je zaprt v prozorni balzam (potopno olje) ali posušimo, nameščeno med dvema kozarcama (predmet in premaz).

Poreklo mikroobdelave izvira pri uporabi slonovine ali navadne kosti kot stojalo za vzorce, ki so bile nameščene med diski prozorne sljude. Podobna zasnova je bila priljubljena v Victorian Angliji, medtem ko je kraljevska mikroskopska družba predstavila standardizirano stekleno mikroskopsko steklo.

Mikro-predelava omogoča dokazovanje notranje celične strukture organizmov, ki pomaga oblikovanju znanja od študentov o eni celični strukturi organizmov. Mikro-predelava se lahko razdeli na dve skupini:

• stalna izdelana tovarna s posebej za usposabljanje;
• začasno, ki ga je učitelj pripravil lekcijo ali v lekciji šolarjev enkratnega časa.

Stalni mikrofruti so najboljši oddelki tkiv organizmov, njihovih organov. Večina celic ni pobarvana in zato, tudi z velikim povečanjem mikroskopa, je težko razmisliti znotrajcelične strukture, vključno z jedrom. V zvezi s tem so celične mikrokriracije pobarvane s posebnimi barvami, ki jim bodo dali večjo jasnost. Učitelji nujno morajo opozoriti otroke, da barva ni naravna za mikrostrukture. Uporabite jih pri preučevanju novih materialov, posplošitev, primerjave in raziskav.

Začasni pripravki so tako imenovani, ker se ne shranjujejo dolgo časa. Po seznanitvi z mikro zajem, se začasni pripravek izpere iz drsnega stekla. Priprava mikroprodaje je ena od obveznih vrst spretnosti, ki nastanejo med biologijo, ki se začne od 6. razreda.

Za študijo živih celic mikroorganizmov, droge "zdrobljene kapljice", "viseče padec", "Impresum", "agarear film" ("mikrokultura"). Živi celični preparati se pregledujejo z mikroskopom "suhimi sistemi". Pripravki, delo, s katerim je že dokončano pred pranjem, hranijo v razkužilni raztopini.

Micross omogočajo široko paleto poskusov, ki jih predvideva programski program za biologijo. Namenjeni so podrobni študiji mikroskopskih struktur pod mikroskopom.

Učitelj za delo z mikro-proces mora jasno razložiti študente, da bi morali videti uporabo tabel, risb, diagramov itd.

Med raziskavo učitelji pogosto uporabljajo "neumne", (brez nalepk) mikrospekcije. Učenci imajo nalogo, da definirajo mikrofratov, povejte o strukturi enega ali drugega tkiva. Priporočljivo je shraniti isti mikro-paket v enem paketu, tako da jih lahko hitro razdelite študentom.

Mikrospesije so shranjene stran od ogrevalnih naprav in tako, da je drsna stekla v vodoravnem položaju, da se prepreči "drsenje" mikrofrekvenčnega procesa.

Zahteve za mikro-obdelavo:

1. Očala morajo biti brezbarvna in prozorna. Pokrito steklo mora biti tanjša od subjekta, ki služi kot osnova izdelka.
2. Mikro-zdravljenje mora biti osredotočeno, tj. Na sredini pokrovanega stekla. Lokacija zelo majhnega predmeta mora biti označena z okvirjem.
3. Mikroskopski oddelki morajo biti zelo subtilni in imajo vse elemente, potrebne za študij.
4. Ločene mikroperaturne tkanine morajo biti pobarvane s svetlim upornim barvilom.
5. Mikro-popravilo mora biti izdelano v obliki niza za vsak del tečaja biologije. Število zdravil z istim imenom v nizu bi moralo zadostovati za laboratorijsko delo vseh študentov v razredu (15-20 kosov).
6. Metodična priporočila je treba pritrditi na niz mikrokritičnih, kjer je treba dati risbe preučenih mikro-predmetov in nalog za samostojno delo študentov.

Študija mikropreparacij v učnem procesu prihaja na metode znanosti, omogoča neposredno opazovanje, da bi videli strukturo organizmov, njihovih delov.

Mikroskopi so mikroskopsko majhni živi predmeti, najboljši oddelki njihovih organov in delov. Ti predmeti se sklenejo med kritjem in predmetnimi očali v posebni rešitvi. Za boljšo razlikovanje, droge so naslikane, zato je barva predmetov umetna.

1. Da, začetek dela z mikrokracijo mora napisati svoje ime, temo laboratorijskih razredov.

2. Študija vsake mikroskopske se začne z ogledom pod mikroskopom pri majhnem povečanju (56x). Nato izberite kraj, kjer so deli boljši vidni, in dajo veliko povečanje (120-300x) in nadaljujte s skico. Pri skiciranju mikroprodaje je treba upoštevati razmerje med velikostjo posameznih delov izvirnika. Sourcing pomaga zapomniti in ustvariti vizualno predstavo predmeta.

3. Najprej, na sliki označuje glavne elemente, nato dopolnjujejo podrobnosti. Slika podpiše ime mikromerature in povečanje, katere risba je narejena. Na eni strani študentskega prenosnika je 2-3 risbe. Glavne strukture mikromerature so označene s kazalci in nasproti vsakemu pismu številki, ki mu sledi njihova dekodiranje. Kontura vijaka pogleda mikroskopa ni označena.

Tako obstajajo dve vrsti mikrofratov - začasno in konstantno. Njihova razlika je v času shranjevanja in kuhanja. Mikro-predelava mora izpolnjevati določene zahteve, ki jih je treba skrbno opazovati. Za pripravo mikrokracije je potrebna posebna oprema, ki je opisana v naslednjem odstavku.

§ 2. Oprema, potrebna za pripravo mikro

Namizje.

V odsotnosti posebne mize se lahko vsaka tabela (po možnosti s predali) prilagodi z uspehom (po možnosti z predali) z delovno površino najmanj 60 * 120cm.

Če pokrov tabele nima posebne prevleke, potem je treba izdelati iz katerega koli materiala, odpornega na vlago. Vendar pa je tabela tabele, namenjena neposredni pripravi dela, v vsakem primeru, je treba pokriti s steklom in urediti majhne (9 * 12 cm) listov belega ali črnega papirja pod njo. To ustvarja ustrezno ozadje, ki olajšuje delo s pobarvano (belo pločevino) in ne obarvanih predmetov (črne pločevine). Priporočljivo je tudi na obeh listih, da nanesite površino drsnega stekla z oznako lokacije in velikosti pokrivnega stekla.

Da bi bilo bolj priročno urediti potrebno opremo, morate imeti pograd polico za reagente, raztopine in jedi, ki so nameščene pred delom (vzdolž hrbtnega roba tabele) ali na strani, odvisno od lokacije tabele glede na vir svetlobe.

Steklenina.

Poročni kozarci z fit čepi Za pripravo histoloških baterij, zasnovanih za pripravo kosov tkiv, da se napolnjujejo z različnimi mediji, se uporablja drugačna zmogljivost od 50 do 200 ml. Večje banke se uporabljajo za pritrditev in shranjevanje kosov tkiv v fiksiranje tekočin, obdelavo objektnih očal, pripravo nevtralnega formalina, itd

Namesto pločevink z obrezovanjem prometnih zastojev, malih gospodinjskih bank z vijačnimi pokrovi, se lahko uporabljajo, različnih količin.

Fuces. - majhne okrogle steklene skodelice različnih premerov in višin z mletimi pokrovi.

Biološki piškotki - Okrogla, ovalna ali kvadrangularna (kot tudi visoke fuces) se uporabljajo za ožičenje histoloških odsekov, nameščenih na slide očala. Če želite posredovati stabilnosti in zagotoviti naročilo v dogovoru, se postavijo v posebne regale iz lesa ali plastike, več kosov v vrsti, odvisno od tehnike predelave.

Petrijeve jedi - široke, ravne steklene skodelice s pokrovi - primerne za različne manipulacije (slikarstvo prosto plavajoče in lepljene na diapozitivih s kaminami, uporabo kot nosilci pod fuces itd.).

Merilne jedi - cilindri in mennisks različnih zmogljivosti (od 10 do 250-500 ml) lijakov različnih velikosti.

Kemične skodelice - Okrogle steklene skodelice brez pokrovov z zmogljivostjo 50-100 ml - se pogosto uporabljajo pri izvajanju histokemičnih reakcij, barvnih kosov lepljenega na steklu itd.

Buska (Stanovanje) - z zmogljivostjo 50 ml do 2 litra. Majhne bučke se uporabljajo za pripravo in shranjevanje raztopin različnih barvil, velikih - pod destilirano vodo in drugih tekočin, porabljenih v velikih količinah.

Pipete Navaden (namenjen za injiciranje drog) se uporablja za kopičenje barvil in različnih tekočin, razvrščeni (z zmogljivostjo 0,1-100 ml) se uporabljajo za merjenje majhnih količin različnih tekočin. Uporabljate lahko trenutno uporabljene avtomatske pipete različnih zmogljivosti.

Kožno steklo - Pravokotne plošče z velikostjo 76 * 25 mm z debelino 1,2-1,4 mm, namenjene namestitvi oddelkov med pripravo mikrocretov. Debelejša očala ne omogočajo ostre slike robov membrane osvetljevalca v ravnini zdravila, saj se izkaže, da je v debelini stekla, in to moti fokusiranje kondenzatorja in ostro zmanjšuje jasnost Slika.

Power Glass. - so tanke (0,15-0,17 mm debeline, debelejša očala poslabšajo kakovost slike) plošče različnih velikosti. Postrezite za pokrivanje obdelanih odsekov, ki se nahajajo na diapozitivnih očalih. Velikost pokrivnih očal je izbrana glede na površino predmeta.

Instrumenti.

Orodja, ki se uporabljajo v histološkem laboratoriju, vključujejo pincete, skalpele, hemostatične objemke, Cornchang, bakteriološke tečaje Spatulas, cepljenje igel so ravna in ukrivljena, kovinska in stekla. Ko je srebrna impregnacija, ko ni mogoče uporabiti kovinskih igel, so potrebne steklene igle.

Prav tako je treba imeti alkohol, krtačo za lase za odstranjevanje kosov z mikrotomičnim nožem, filtrirnim papirjem, iglam, niti, gostem papirja za označevanje materiala, leucoplasty in stekleni svinčnik.

Priprava objektnih očal.

Kožna očala, ki se uporabljajo za pridobitev histoloških pripravkov, morajo biti pripravljena za pripravo. Izjema je pripravljena za uporabo in posebej zapakirane uvožene steklene diapozitive.

Kožna očala speremo v toplo milnico ali kuhamo 15 minut v 2-3% raztopini natrijevega bikarbonata, nato speremo z vročo vodo in izperemo nekaj ur v tekoči vodi. Pranje očala obrišite s čisto bombažno krpo in jih nekaj dni postavi v 96% alkohola. Razmrlitvena očala odstranijo s pinceto iz te zmesi, obrišite s čisto krpo in jo zložite v polje.

Kozarska očala so dobro razmaščena v močni raztopini klorovodikove kisline. Po nekaj dneh se sperejo s tekočo vodo in posušijo.

Kakovost razmaščevanja lahko preverite s pijan na drsni vodi iz pipete: voda širi vodo s tanko plastjo in ne gre v kapljico.

Za boljšo pritrditev kosov na steklu je vnaprej namazana z mešanico beljakovin z glicerinom. Sveža jajca bela stepela in filtriramo skozi velikega poročnega filtra, navlaženega z destilirano vodo, nato pa mešamo z enakomernim volumnom glicerola in dodamo več timolnih kristalov. Zmes se shrani več mesecev. Uporablja se tudi zmes, ki je sestavljen iz 15 ml krvnega seruma, 5 ml destilirane vode in 6 ml 5% formalarina. Po filtraciji je zmes pripravljena na to, da se nanesite na drsnik. Njegova uporaba daje najboljše rezultate kot uporaba jajčnih beljakovin, saj se ozadje ne oblikuje pri slikarstvu.

Če želite uporabiti protein na slikovnem steklu v eni roki, se 5-6 kozarcev vzame v obliki ventilatorja, in drugemu - čisti stekleni palici, ki se nanese z beljakovino, se dotika vsakega stekla. Potem se beljakovin triturira z razmašenim alkoholom s prstom na površini kozarca do njegove sredine, ki spremlja rahlo napor. Nekateri avtorji se priporoča, da se ogreje steklo v termostatu, vendar izkušnje kažejo, da je nepotrebno, saj po prenosu kosov na kozarcih so nameščeni v termostatu ali na posebno tabelo za sušenje, kjer je koagulacija beljakovin na istočasno.

Postopek za pritrditev reza na predmetno steklo brez pred-drgnjenja zadnjega proteina z glicerinom je razvit.

V kopeli s toplo destilirano vodo, nekaj kapljic tekoče kazein lepilo kaplja in mešamo. Rezine se znižajo v nastalo tekočino v gramofu, lahko naredimo iglo vakuina in ulov na čisto maščobno steklo.

Ta metoda daje dosledno dober učinek in ni pobarvanega ozadja okoli reza, kot se pogosto dogaja, ko uporabljate beljakovina.

Tako sta posebna oprema in orodja potrebna za pripravo mikrokriranja. Glavni so vsebinsko in premazno steklo. Preden začnete pripraviti mikroprodukt, je potrebno pravilno pripraviti diaprojekcija. Posebne zahteve so predstavljene tudi njihovi skladišču. Toda priprava ene opreme ni dovolj za pripravo mikrokracije, je treba pripraviti tudi za pripravo materialov za raziskave. To je podrobno navedeno v naslednjem odstavku.

§ 3. Priprava materiala za pripravo microDrugs

Mikropreparanje so razdeljene na začasno in konstantno. Priprava materiala za začasne pripravke vključuje pritrditev in slikanje.

Fixation je proces hitrega ohranjanja celičnih struktur, v katerih se vsi fiziološki biokemični procesi ustavijo, in vodotopne snovi gredo v netopno stanje. Posledično vam fiksiranje omogoča ohranjanje znotrajceličnih struktur nespremenjene za dolgo časa. Vendar pa se lahko pri pritrditvi v celicah pojavijo artefakte - nove strukture, ki so v živo celico odsotne, na primer različne vakuole. Da bi preprečili videz artefaktov, je treba uporabiti posebej izbrane kemijske rešitve - sponke in sama fiksacija je treba izvesti pod določenimi pogoji. Zlasti je zaželeno uporabiti ohlajene ključavnice (do 2-3 stopinj); Za pritrditev, morate vzeti posamezne celice ali kosov tkanin niso debelejši od 5 mm; Obseg zadrževalca mora presegati prostornine fiksnega materiala 50-100 krat; Držalo se ne sme uporabljati za dolgoročno shranjevanje materiala; Zadrževalnik se ne sme ponovno uporabiti.

Upoštevajte sestavo in uporabo najbolj razširjenih objemk.

Formalin (formaldehid, ali Ant aldehid). Najenostavnejši in najpogostejši zadrževalnik. Uporablja se v obliki vodnih raztopin s koncentracijo 4-10%, 100% pa se upošteva koncentracija prodajnega formalarina. Formalator prodaje obsega mešanico mravljinčne kisline, ki je nevtraliziran z ogljikovim dioksidom 24 ur. Čas pritrditve od 1 uro do 24 ur. Za dolgoročno skladiščenje se material prenese na sveže 10% formalin. Purefilin se uporablja, če je načrtovana nadaljnja študija lokalizacije in aktivnosti encimov. Pogosteje je formalin vključen v formulacijo bolj zapletenih objemk.

Alkoholne objemke. Vsebujejo etil ali metil alkohol. Vodne raztopine alkoholov v čisti obliki (70%, 96% ali 100%) so relativno redko uporabljene. 100% alkoholov se pogosteje uporabljajo, ki se mešajo z drugimi snovmi. Upoštevati je treba, da sta metilni alkohol (metanol) in njegovi pari strupeni.

Različne sestavke na podlagi formalnih, alkoholov, organskih kislin in anorganskih snovi se uporabljajo kot univerzalne ključavnice.

Ocetni alkohol (acetalna industrija). To je ena najbolj preprostih ključavnic. Sestavljen je iz 3 delov absolutnega alkohola (etila in boljše - metil) in 1 del ledene ocetne kisline. Za pripravo 100% (absolutnega) alkohola so začetni alkoholi dehidrirani. Brezvodni bakreni sulfat se uporablja za dehidriranje etilnega alkohola (etanola), in za dehidracijo metilnega alkohola (metanola), kalcijevega oksida. Jih shranite v hermetične jedi. Upoštevati je treba, da so vsi absolutni alkoholi še posebej strupeni. Za pripravo ledu ocetne kisline se začetna koncentrirana kislina ohladi v hladilniku; Hkrati, kislina zamrzne, prej kot voda. Tekočina se izsuši, zamrznjena kislina pa se odmrzne in se uporablja za pripravo zadrževalca. Po 24 urah je zadrževalnik pripravljen za uporabo. Shranite držalo na temnem hladnem mestu. Čas zaklepanja - 2 ... 24 ur. Potem se material prenese na svež držalo, v katerem se lahko shrani do 1 mesec v hladilniku. Za daljše skladiščenje se material prenese na 70% alkohola.

Carnuis Lock. SESTAVA - Absolutni alkohol - 10 cm3 ; Chloroform - 3 cm3 ; Ocetna kislina - 1 cm3 . Pritrditev zaklepanja 1-3 ure.

FIXTORS, ki vsebujejo picirko kislino, na primer zmesjo, da se Bean-15 ml nasičene vodne raztopine picric kisline: 5 delov formalarina: 1 del ledene ocetne kisline. To držalo se pripravi takoj pred uporabo. Čas pritrditve od 1 do 24 ur (včasih nekaj dni). Fiksni material je shranjen v 70% alkohola.

Pritrdilni aparati, ki vsebujejo suleix (živosrebrni klorid (II) - HGCL2 ). Sulema se uporablja v obliki nasičene vodne raztopine v mešanici z ledeno ocetno kislino (25: 1), formalinom (8,5: 1) in bolj kompleksnimi sestavki ("susa" zaklepanje, ključavnico Cenker, itd.). Čas zaklepanja od 1 do 24 ur. Nato se Suleix odstrani z alkoholno raztopino joda (6 delov 70% alkohola: 1 del tinkture joda), jod pa se odstrani s 70% alkohola. Fiksni material je shranjen v 70% alkohola.

Fiksatorji, ki vsebujejo osmium (štiri-komentirano osmium ali osmiumsko kislino). Dajte najboljše rezultate, ki se uporabljajo pri proizvodnji zdravil, tako za lahka in elektronska mikroskopija. Lahko uporabite 1-2% raztopino OSFIC kisline, vendar pogosteje se sestavki uporabljajo, na primer, lahka zadrževalnik - 15 delov 2% osmizne kisline: 1 del ledene ocetne kisline. Fiksiranje poteka počasi (od 24 ur do več dni).

Poleg naštetih generalnih aplikatorjev so tudi posebne objemke. Mitohondrijsko držalo na primer vsebuje 4 dele 3% raztopine kalijevega dikromata in 1 del 40% formalarina. Zaklepanje za kloroplastov vsebuje 15 delov nasičene raztopine bakrovega sulfata, 1 del 40% formalina in 5 delov vode.

V nekaterih primerih se namesto kemične fiksacije uporablja hitro zamrzovanje vzorcev, na primer pri temperaturi tekoče dušika (-1960 ) ali pri temperaturah suhega ledu (-780 ). Zamrznjeni predmeti se lahko dehidrirajo z sublimacijo vode v vakuumu pri temperaturah pod -400 (Ta proces se imenuje liofilizacija).

Ohranjanje vam omogoča, da prepoznate intracelularne strukture s povečano afiniteto za določene barve. Barvila so relativno nizke organske snovi molekulske mase z večjo afiniteto za nekatere kemijske komponente celice.

Obstaja veliko barvil, ki se uporabljajo za različne namene. Upoštevati je treba, da je izbira barvila povezana z značajem fiksiranja in različnih metod predobdelave celic.

Imena barvil lahko ustrezajo nastali barvi (Ruby, Carmine, metil modri, metilen modri, redni vijolični, metil zeleni, oranžni zlato). Včasih se ruska imena barv nadomesti z nemščino, na primer: metilblau, redni zrak. V drugih primerih so imena preusmerjena, zgodovinsko razvita, na primer: pironin, fuchsin, safranin, floreoglucin, sudan III. Včasih se ime barve ne ujema z nastalo barvo, na primer, modra Thionin daje vijolično rdečo barvanje. Imena kemičnih nomenklature barvil so precej redke, na primer: dimetilaminobenzaldehid, 8-amino-1-naphal-5-sulfonska kislina.

Obstajajo osnovni (alkalni), kisli in nevtralni barvi. Glavne barve selektivno barvajo bazofilnih celičnih konstrukcij (to je, strukture s kislimi lastnostmi). Barvila kisline selektivno barvne acidofilne ali oksifly celične strukture (ki so, strukture z alkalnimi lastnostmi). Nevtralne barve so pobarvane in bazofilne, acidofilne strukture.

Za vsako življenjsko barvo celic se uporabljajo najmanj toksične barve. Te barve se običajno uporabljajo v obliki vodnih raztopin, na primer: metilen modra (koncentracija 1: 1000 do 1: 10000), tričarska modra (0,5% raztopina), nevtralna rdeča (od 1: 50000 do 1: 200000).

Barvila za fiksne celice se lahko uporabljajo v čisti obliki (vodne ali alkoholne raztopine, koncentracija od 0,1% do 1%), na primer: eozin, fuchsin. Mešanice barvil se pogosto uporabljajo, na primer, mešanica Romanovsky-gimme (vsebuje metilen-azur, metilen vijolično, metilen modro in eozin), slikarstvo v skladu z MULLDARI (zaporedna uporaba kisline fuchsin s, nato zmešanja anilina modre barve in Orange Gold G), Azur Eozin, metilblau-eozin.

Vendar pa je pogosteje oblikovana barva med pripravo. Na primer, dobro znana snov rastlinskega izvora hematoksilin postane barvilo šele po oksidaciji do hematheina. Za obarvanje jeder in kromosomov se barvila pogosto uporabljajo v kombinaciji z organskimi kislinami. Razmislite o načinih kuhanja nekaterih najbolj preprostih barvil.

Kuhanje 2% acetophin. 1 gram glavnega fuchsina raztopimo v 50 ml 40% ocetne kisline, ko se segreje v vodni kopeli.

Priprava 1% acetorceina. 50 ml ledene ocetne kisline dodamo na 1 Ralm in vztrajajo približno 12 ur. Zmes nato segrevamo, da zavre in dodamo 50 ml destilirane vode. Nato segrevamo na vrenje in ohladimo, ponavljam ta postopek 10-krat. Po enem dnevu je barvilo filtriralo. 1 del 1 n dodamo pred obarvanjem na 9 delih barvila. HCl.

Priprava 4% acetocarmin. Rešitev je pripravljena v bučki, odporni na toploto, z vodnim hladilnikom. 4 gramov acetocarmin se mešajo s 100 ml 50% ocetne kisline, in zavre 1 uro. Po enem dnevu je barvilo filtriralo. Podobno je pripravljen acetolakmoid.

Namesto ocetne kisline se pogosto uporabljajo druge organske kisline, na primer 40% mlečne kisline.

Vse barve po kuhanju filtriramo in shranjujejo na temnem hladnem mestu. Čas barvanja zdravil je odvisen od temperature (običajno od 20 minut do 1 dan). Pri segrevanju ali vretju se čas barvanja zmanjša.

Poleg obarvanja z ekološkimi barvami se lahko posamezne strukture dodelijo z uporabo njihove impregnacije s srebrnimi in drugimi kovinami.

Zato je potrebna priprava nekaterih začasnih mikrokrirov, fiksacije in barvanja materiala, ki je predmet študija. Zahvaljujoč temu je bolje razmisliti o predmetu pod mikroskopom. Natančneje, bomo povedali o metodah priprave mikrokraparjev v četrtem odstavku.

§ 4. Metode za pripravo mikro-popravila

Pri proizvodnji začasnih mikrocretov je treba upoštevati naslednje zaporedje operacij: \\ t

1. Operite in skrbno obrišite vsebinsko in premazno steklo. Da ne bi prekinil zelo krhkega stekla za premazovanje, je potrebno, da ga postavite v gube servieta med velikimi in indeksnimi prsti desne roke in ga previdno obrišite s krožnimi gibi prstov.

2. Nanesite kapljico tekočine (voda, glicerol, raztopino, reagent ali barvilo na slide steklo.

3. Naredite rezanje preučevanega organa s pomočjo rezila. Rezilo mora biti zelo ostro.

4. Izberite najtanjše rezanje, ga prenesite z vakuumsko iglo ali tanko krtačo na sredino drsnega stekla tekočine.

5. Zaprite dno s pokrovom, tako da ga zrak ne udari. Če želite to narediti, pokriti steklo z dvema prstoma, ki je zapuščena in znižala spodnjo črto do roba kapljice tekočine in nemoteno spustite.

6. Če je veliko tekočin, in izhaja iz pod nosilnim steklom, ga odstranite s filtrirnim papirjem. Če so mesta, napolnjena z zrakom, ostala pod steklom za premazovanje, nato dodajte tekočino, ki jo postavite s padcem poleg roba pokrivnega stekla in na nasprotni strani filtrirnega papirja.

Pred učiteljem biologije in glavov krogov je prezgodaj ali pozno nalogo, da se usposabljanje mikrokrirajo. Kaj je snov, ki lahko dolgo časa popravi biološki predmet, in kako narediti ta postopek preprost in cenovno ugoden. Slavni balzami (zaklepanje smole) niso bili nikoli obdelani z lahko dostopnimi snovmi, zlasti v razdalji od velikih mest. Poleg tega pravijo, da te snovi niso neškodljive. In končno, proces njihove uporabe je precej težak.

Za izdelavo zdravila lahko uporabite PVA lepilo. Pomembno je, da je zdravilo mokro, dobro navlaženo, lepilo pa je sveža in rahlo razredčena s čisto hladno kuhano vodo do želene koncentracije (lepilo predstavlja emulzijo in se zlahka razveza). Po več vzorcih in napakah bo želena koncentracija izdelana in ugotovljena brez težav.

Potem, padec vode - kuhana ali destilirana na čistem steklu. Voda je treba natančno odstraniti s čisto, ne pušča dlak s krpo ali filtrirnim papirjem, tako da je steklo rahlo vlažno. To, kot tudi vlago vzorca, prispeva k uniformi (brez mehurčkov) omočenje. Na pripravljeni površini morate uporabiti majhen padec vnaprej pripravljenega lepila PVA, tako da se zračni mehurčki ne pojavijo. Včasih se ne vmešavajo, ampak videz droga. V tem kapljici je vnaprej pripravljena rezina ali vzorec lepo prenesena, na primer, predhodno vdor tople vode Daphny. Potem z gladkim nagnjenim gibanjem, je potrebno, da je premazno steklo, tudi čisto in rahlo vlažno. Plast lepila med očali mora biti čim tanka.

Če nekaj ni uspelo, je vzorec dragocen in precej velik, skoraj vedno, za razliko od smole, je mogoče, da ga operemo s preprosto vodo in ponovite postopek. Presežek lepilo lepo izpere s tanko teče vode; Zato je treba slediti, da se med očali ne registrira. Steklo za premazovanje je treba hraniti. Nekoliko motne ostanke vode se lahko skrbno odstranite s filtrirnim papirjem ali trakom tanke tkanine brez kupa.

Pripravljene droge je treba razgraditi na toplem suhem mestu. Kazalnik priprave priprave je njegova preglednost. Odvisno od številnih dejavnikov se sušenje na pregledno stanje nadaljuje od enega do štiri tedne. To se zgodi, da je preveč debela plast lepila ali lepila, onesnažena z nečistoč, je popolnoma pregleden, ne poslabša slike nekoliko, vendar zahvaljujoč majhni globini ostrine mikroskopa, celo takšnih zdravil so na voljo za študij.

Ni jamstva, da se ta metoda lahko uporabi za izdelavo vseh zdravil, saj nekateri od njih zahtevajo obarvanje, in barvila lahko interakcijo z lepilom.

Tako imenovani Lashkin, učitelj biologije in ekologija srednje šole št. 23, od Syzran predlaga naslednjo metodo kuhanja mikrokracije. Lahko vzamete navadno želatino, ga nalijte z vodo za otekanje. Potem v žlici, da pokličete nekaj nabreknejo želatine (brez vode) in segrejemo nad ognjem. Ko se želatina razprši (ni potrebna za kuhanje), jo spustite na diapozitiv. V tem kapljici, postavite vzorec in zaprite steklo za premazovanje, da jo dobro pritisnete za enotno porazdelitev želatine. Mikropreparanje.

Namesto pokritega stekla lahko uporabite celofan, če ni premaznih kozarcev. Poleg tega ima violofan ene prednosti: mikro-obdelava ni mogoče zdrobiti, ker Cellofan je elastičen in ne razpokan kot premaz.

Z želatinom je potrebno hitro delati, sicer zamrzne. Ampak, če se to zgodi, je dovolj, da držite steklo nad ognjem - in želatina bo spet postala tekoča. Želatina je neškodljiva, dostopna in zelo ekonomična.

Priprava oddelkov rastlin

Za izdelavo oddelkov objekt vzame velike in indeksne prste na levi strani in s pomočjo skalpela ali noža poravnajte njegovo površino. Na desni strani vzemite rezilo ali britvico in jih naredite gladko hitro gibanje na predmetu sami in desno (glejte Dodatek sl. 1, A). Oddelki morajo biti majhni in tanki. Odstranijo se iz rezil z mehkim resilom in prenesejo na drsno steklo v kapljici medija (glejte Dodatek sl. 1, B).

Za izdelavo odsekov majhnih objektov so slednje nameščene v jedro starejšega (glej Dodatek sl. 2), ki je predhodno opravil rezanje ali vdolbino, in je operacija izvedena zgoraj. Rezilo, ki se uporablja za izdelavo oddelkov, mora biti ostro (zlahka rezati lase).

Mikropreparanje na Botanici

Epiderma Consuff pripravo na dnu deviške Tradesska Liaf v kapljici vode.

Za izdelavo zdravila, bo list tradescans ovell okoli kazalca na levi roki, tako da je spodnja stran vijolične barve obrnjena navzven. Z desno roko s pomočjo prazne igle za razbremenitev epiderma s srednjim jopičem na sredini pločevine in pincete, da odstranite svoj kos. Hkrati je del listice (mezofil) nehote zajet, vendar lahko običajno najdete tanek del na obrobju, ki je sestavljen iz ene vrstice epidermalnih celic. Raztrgana rezina na drsenje v kapljici vode z zunanjo stranjo navzgor in pokrijte s premazom stekla.

Celice iz celice Eldine celice kanadske celice.

V zgornjem delu Eldine pobeg s pomočjo pincete, odtrgajte list in premaknite vodo na steklenico. List je treba dati na spodnji strani predmeta.

Priprava kromoplastov v celicah zrelih sadežev.

S pomočjo priprave igle, vzemite majhne koščke celuloze zrele doline sadje, rowan in rosehip. Vsak kos vode postavite v kapljico vode na diapozitiv in nežno razdelite celice. Pokrov s premazom.

Priprava škrobnih zrn krompirja.

Odrežite tuber krompirja. S svežo površino rezanja vzemite majhno količino tekočine na skalpelo in prenesite na kapljico vode na drsno steklo, pokrijte pokrovček.

Priprava rocklode hruškastih mastnih celic.

Na rezini svežega ali fiksnega z alkoholom izboklijev hrušk najdete skupino kamnitih celic, jih odstranite. Postavite na diapozitiv in dajte vrh skalpela.

Nanesite na kamnito celice kapljice 1% raztopine florerhlucina v 50% etanolu, nato dodajte nekaj kapljic koncentrirane klorovodikove kisline (pri delu s koncentrirano kislino, je treba upoštevati varnostne predpise).

Tople lupine bodo pridobile češnjevo-rdečo ali rdečo barvo.

Po videzu obarvanja odstranite reagent s filtrirnim papirjem, dodamo kapljico glicerola in pokrijte pripravo s premazom stekla.

Priprava želodčnih celic rastline.

Več odsekov spodnjih epiderma je pripravljenih in jih postavimo 2 uri v 5% raztopini glicerina. Oddelki so nameščeni na slide v isti raztopini. Razmislite o zdravilu.

Nato zamenjajte glicerin na vodo in ga izvlečete iz stekla s filtrirnim papirjem. Gledanje, kaj se je spremenilo.

Po tem se voda nadomesti z raztopino 20% glicerola ali 1M raztopino saharoze. Spremembe gledal (glejte Dodatek sl. 3).

Priprava mikrohraz na zoologiji

Priprava zdravila najpreprostejših organizmov poenotene infuzije.

S pomočjo steklene palice postavite kapljico metilcelulozne raztopine na drsni kozarec.

Pipeta kapljice v to raztopino s seno infuzijo. Pokrijte kapljico s premazom. Razmislite o mikroskopu[ 6 ] .

Priprava mikrotapin v človeški fiziologiji

Zdraviloma kri za študijo Formule levkocitov.Za suho stekleno steklo se nanese kapljica krvi (glejte Dodatek sl. 4, A). Brusilno steklo je nameščeno pod kotom 45 ° na predmet. Kri, ko se obrnete na brusilno steklo ob robu (glejte Dodatek sl. 4, B). Po tem je brusilno steklo napredovalo hitremu gibanju, drsenje na površini drsnega stekla. V tem primeru je kri žala s tanko enakomerno plastjo vzdolž predmetnega stekla (glejte Dodatek sl. 4, B).

Dobro kuhana krvava razmaza izgleda kot razdalja rumenkasto, enotno in pregledno. V tem primeru se v njej nahaja enoten element v eni plasti.

Priprava mikrobiologov

Priprava drog mrtvih celic mikroorganizmov.

Za podrobno študijo mikroorganizmov se uporabljajo fiksne mikrohragi. Pri popravljanju mikrobov so ubiti in nato obarvani.

Priprava fiksnih pripravkov je sestavljena iz naslednjih operacij: priprava raztresa, sušenje zdravila, njegovo pritrditev, barvanje in sušenje.

1 stopnja: Masowing Technology (glejte Application Sl. pet).

1. Priprava brisanja z gostem hranilnega medija

• majhen kapljic fiziološke raztopine se nanese na skim naklonskega stekla;
• na desni strani vzemite bakteriološko zanko, v levo - preskusno cev s kulturo;
• zanke sterilizirajte, prinesemo v plamen gorilnika v navpičnem položaju (žareče klobase) (glejte Dodatek Sl. 5-1);
• odstranite cev iz testne cevi, jo zajemite z majhnim prstom desne roke in požgali rob testne cevi na alkoholu (glejte Dodatek sl. 5-2);
• zanka se prinese v cev, ohladi, se dotika zidov, po kateri se majhna količina kulture odstrani s površine medija (glejte Dodatek sl. 5-4);
• zanka se odstrani, ne da bi se dotaknila stene cevi, gorijo robove preskusne cevi nad alkoholom in zaprete vtič (glejte Dodatek sl. 5-5,6);
• ujetna mikrobna kultura je narejena v kapljici fiziološke raztopine, skrbno mešamo in enakomerno porazdeljeno preko stekla v obliki ovalnega, kroga ali kvadrata s površino 1-1,5 cm2 (glej Dodatek Sl. 5-7);
• na koncu priprave raztresa se zanka ponovno sterilizira (glej Dodatek Sl. 5-8).

1. Pri izdelavi razmazanih pridelkov iz tekočega hranilnega medija na diapozitivu se uporabljajo 1-3 zanke materiala, ki se ukvarjajo s študijem, enakomerno porazdeljene; V tem primeru uporaba slanice ni potrebna. Naslednji prispenek, kot je opisano zgoraj.

2. faza: sušenje mesnih.

Kuhana kap sušimo v zraku, nad plamenom gorilnika (vendar ne v plamenu), v toku toplega zraka ali v termostatu.

Potrebno je vedeti, da lahko ogrevanje moti strukturo mikrobov, pa tudi dejstvo, da ne bo konec posušenega pripravka med fiksacijo pokvarjena.

3 Faza: pritrjevanje madežev.

Obstajajo fizikalne in kemijske metode. Pri določanju fizične metode stekla s kapjo navzgor, počasi porabite 3-4-krat skozi plamen. Hkrati, mikroorganizmi umrejo, se razmaza pritrdi na steklo in se ne izpere. Od premajhnega kontaminiranega razmaka mikrobov se izpere, uničenje mikroorganizmov opazimo v ponovili, to je dekompresija ločenih fragmentov.

Fiksiranje s kemijsko metodo se doseže z potopitvijo madežev v fiksno tekočino, ki je lahko:

Alkohol (15-20 min)

Alkohola-eter (10-15 min)

Metil alkohol (5 min)

Kloroform (nekaj sekund)

Ohlajeni aceton (5 min)

4 faza: barvanje madežev.

Barvanje mikroorganizmov ima veliko diagnostično vrednost. To je kompleksen fizikalno-kemijski proces, v mehanizmu, katere pojavi adsorpcije, kapilarity, kemijsko afiniteto med barvilom in pobarvanim predmetom, pH medija, v katerem se nahajajo, igrajo.

Obstajajo preproste (približne) in kompleksne (diferencialne) metode barvanja mikroorganizmov.

Enostavna barvila.

Preprosta barvanje bakterij razkriva samo njihovo morfologijo (oblika, velikost in medsebojna ureditev mikrobov). Običajno se uporablja samo en barvilo (metilen modra ali mulna vijolična). Mešajte pozitivne in negativne metode barvanja.

Pozitivno:

• Kuhani in fiksni razmazu se postavijo v poseben most čez kopel.
• Uporabite katero koli barvilo za določen čas (količina barve mora biti tako, da pokrije celotno površino raztresa, nekaj kapljic). Hkrati je treba zagotoviti, da se barva ne nabrekne na razmazu, če je potrebno, se na raztresu zlijejo novi deli barvila.
• Nato previdno in hitro speremo z vodo.
• Posušimo s filtrirnim papirjem.
• Uporabite kapljico potopnega olja in mikroskopske.

Memazit se šteje za visoko kakovost, če se bakterije razporedijo izolirane drug od drugega in enakomerno pobarvane.

Negativen:

V tem primeru je metoda naslikana z ozadjem brisanja, mikroorganizmi pa ostajajo nebarvani. Uporablja se za preučevanje mikroorganizmov, katerih lupine slabo zaznavajo aniline barve (leptospira, spirochetes).

• Kopljenje trupov se nanese na rob predmeta stekla in zmešajo njeno zanko s kapljico kulture.
• Metega je narejen z robom talnega drsnega stekla podobno kot pri pripravi krvnega brisanja (glejte Dodatek sl. 6). Predmetno steklo je položeno na vodoravno površino in se drži leve roke; Desna roka do padca se premakne pod kotom 450 Mletje stekla, ob robu, od katerega se kaplje enakomerno širi; Takoj, tesno s pritiskom na brusilno steklo v istem položaju pod kotom, jo \u200b\u200bpromoviramo na levo v predmetu, pri čemer dobimo enotno brisanje.
• Dajejo suho in mikroskopijo.

Diferencialna (zahtevna) barvanje.

Kompleks ali diferencialne metode slikarskih bakterij temeljijo na posebnosti fizikalno-kemijske strukture mikrobne celice. Pustite, da uporaba več raztopin barvil in reagentov, določajo morfološke lastnosti in strukturne komponente celice (spore, kapsule, volati itd.).

Ena od najpomembnejših metod je barvanje mikrobov z gramom. To je univerzalna diferencialna diagnostična metoda barvanja, ki jo predlaga danski znanstvenik leta 1884. Uporablja se kot eden od ključev v determinantah mikrobov.

Barvanje mikrobov v gram.

Mikrobna grapspektivnost je odvisna od kemične sestave bakterijske celice in strukture celične stene.

• Majhen kos filtrirnega papirja je nameščen na fiksni kapi in raztopina genecioviolata se vlije za 1-2 minute.
• Odstranite papir, izpraznite barvo in brez pranja z vodo, raztopino za lumiljenje izlijemo 1 minuto (polnjenje razmaza).
• Okvir z alkoholom 30 sekund (potopljen v skodelico 2-3 krat).
• Izperemo z vodo.
• Dodatno razredčimo z razredčenim fuksinom za 1-2 minute.
• Obarvajte barvo, speremo z vodo, suho s filtrirnim papirjem, pregledate s sistemom potopanja.

Gram-pozitivni mikroorganizmi so pobarvani z vijolično, niso obarvani z alkoholom in ne zaznavajo glavnega fuchsina. Gram-negativni mikroorganizmi so obarvani z alkoholom in pridobijo rožnato rdečo barvo iz fuchic barvanje.

Odkrivanje kapsul z negativnim kontrastom.

Majhno število celic s trdnim hranilnim medijem se namesti na zanko na sliki razredčenega fuchsina, pomešamo s kapljico trupov, prekrita s prevleko stekla in gledano pod mikroskopom. Na sivem ozadju zdravila, brezbarvnih kapsul, okoliških celic mikroorganizmov, pobarvanih v rožnati barvi.

Barvanje endospore.

• Metilen Blue se nalije na fiksni razmazu (Lefelera).
• Barva je nastavljena na vrenje, ki drži stekleno steklo nad plamenskim gorilnikom. Ko barva izhlapi, se doda. Trajanje barve Tri-čas, 10-15 sekund.
• Slide se ohladi in temeljito izpere z vodo.
• Poleg tega je v 30 sekundah, 0,5% vodne raztopine saffranina (ali Fucene Cying) styled.
• Barva se izsuši, zdravilo speremo z vodo, posušimo in gledamo pod mikroskopom.

Z ustreznim obarvanjem so vegetativne celice rdeče, in polemika je modra (svetlo roza).

5 Faza: sušenje.

Voda, ki ostane na steklu po pranju, je previdno odstranjena s filtrirnim papirjem ali sesanje z robom papirja, ali rahlo pritisnete kos papirja na bris. Pobarvana razmaza mora biti popolnoma suha, saj se oblike vodne ostanke s cedrovim oljem, ki se nanaša na razmaza, turbidno emulzijo, ki ovira mikroskopacijo.

Priprava zdravil živih celic mikroorganizmov.

Način proučevanja mikrobov v živahnem jeznem stanju ima naslednje prednosti: \\ t

• Mikrobi se preučujejo v nedotaknjeni obliki.
• Opazovanje mikrobov v dnevni obliki vam omogoča, da ugotovite številne lastnosti, ki niso zaznane iz ubitih mikrobov (aktivna mobilnost).

Hkrati pa ima metoda številne pomanjkljivosti:

• Težave pri proučevanju neobarvanih mikrobov zaradi majhne velikosti.
• Nezmožnost, da se dolgo osredotočimo na mikrobo, saj se hitro premakne s vidnega polja.

V živem stanju mikrobov se pregledajo v "zdrobljenem padcu", "viseči padec" in "Impresum", prav tako upoštevata "agarski film"; V nekaterih primerih ga uporablja življenjska doba (vitalna) mikrobna barva.

Droga "zdrobljena kapljica".

Za stekleno steklo se nanese kapljica vode, v njem se nahaja majhno število celic mikroorganizmov, mešamo in prekrito s premazom. Mikroorganizmi, ki se gojijo in na ploski in v tekočemu hranilnici, se odvajajo v kapljici vodne bakteriološke zanke; V tekočem mediju se lahko prenaša kot sterilna pipeta. S stalno študijo mikroskopskega predmeta roba pokrovanega stekla, je priporočljivo, da polijo lak za nohte, ki bo preprečil hitro sušenje zdravila (glej Dodatek sl. 7).

Zdravilo "visi padec".

Za pokrivalno steklo se nanese kapljica suspenzije mikroorganizmov zanke ali običajnega peresa, ki vklopi spustnik in postavi na poseben diapozitiv s poglabljanjem (dobro) v centru. Kapljica naj se prosto visi, ne da bi se dotaknila robov in dna vodnjaka. Robovi vodnjakov so vnaprej namazani z vazelinom. Kapljica se izkaže za zapečatena v mokri komori, zaradi česar je mogoče večdnevno opazovanje predmeta. Za dolgoročne opazovanja, sterilno stekleno uporabo, in suspenzija mikroorganizmov je pripravljena v tekoče hranilni medij. Pri delu z bakterijami se redko uporablja (glej Dodatek sl. 8).

Priprava predprint.

Z agarskega medija, na katerem se mikroorganizmi rastejo s trdnim travnikom ali v obliki posameznih kolonij, odrežite majhno kocko s skalpelom in jo prenesite na drsnik, tako da se površina z mikroorganizmi sooča navzgor. Potem je čisto prevleko naneseno na trato ali kolonije, rahlo pritisnete zanko ali pincete na njem in ga vzemite izklop, da se ne premaknete. Nastalo zdravilo je nameščeno odtis v kapljici vode ali metilen modre (1:40) na diapozitivu. Odtis se lahko dobimo tudi na predmetu, če se dotaknemo površine kolonije ali trate s steklenim steklom. Uporabljajo predvsem v študiju pioniranja Streptomicetes.

Priprava "Agarov film" (ali "mikrokultura").

Tanka sterilizirani in ogrevani stekleni drsnik se nanese s sterilno ogrevano pipeto 0,2-0,3 ml naročnega agariziranega hranilnega medija in porazdeljene po celotni površini stekla. Po zagonu medija je zanka odstranjena odvečni agar, kar pušča dva tanke dele filma, velikost premaza stekla. Padec tekoče kulture ali suspenzije celic mikroorganizma se uporablja za središče kvadratov bakterijske zanke ali pipeta. Steklo je nameščeno v mokro komoro (skodelico petrija s plastjo mokrega filtriranega papirja), ki se postavi v termostat. Pred mikrokompiranjem na filmu z odraščajo mikro silo, kapljico barve ali kapljice vode v primeru sušenja filma in nato skrbno prekrito s premazom stekla.

Dviganje slikarstva mikrobov.

Pri delu z drobljenim padcem za boljšo vidljivost mikrobov je lahko tekočina rahlo konzervirana z vnosom majhnega padca barvila pod pokrovom. Hkrati bodo bakterije pobarvane in bodo jasnejše vidne na področju razgled na mikroskop.

1 Metoda barvila:

• Za čisto steklo se nanese nasičena vodna raztopina metilenske modre.
• Dajte suho.
• Steklo je obrisano s steklom, dokler se blaže ne bo sprejela svetlo modrega sence.
• Za diapozitiv in prevleke s premazom stekla se uporablja kapljica materiala.
• Mikrobi se postopoma pobarvamo v modri barvi, ki ostanejo žive.

2 način slikanja:

Kapljica materiala v študiju se zmeša na steklenem steklu z barvo (0,1-0,01%), pokrijte s premazom stekla in se upoštevajo pod mikroskopom.

Tako smo študirali, za katere obstajajo metode za pripravo začasnih in stalnih mikrokriracij, iz katerih jih je mogoče pripraviti organizmi. Ugotovljeno je bilo, da se mikrofratov pogosto uporabljajo v vseh bioloških znanostih.

Zaključek

Študija znanstvene in metodične literature nam je omogočila, da pripravimo sklepe, da se mikrofficirajo, ki se pogosto uporabljajo v izkušnjah o biologiji, in za to morate biti sposobni izdelati.

Mikropreparanje so razdeljene na začasno in konstantno. Začasni pripravki niso shranjeni, pripravljajo se med laboratorijsko delo, takoj pred učenjem predmeta. Stalna zdravila se lahko shranijo že več let. V glavnem jih proizvajajo industrijski, vendar jih lahko pripravite sami.

Mikro-obdelava je predstavljena z določenimi zahtevami za proizvodnjo, shranjevanje in uporabo, ki jih je treba upoštevati.

Pred poukom mora učitelj učencem poučiti, kako pravilno ravnati z mikrokracijo.

Posebna oprema in orodja so potrebna za pripravo mikrokripacij na biologiji: kože kože, prevlečna očala, pipete, petrijeve jedi, različne bučke, cepljenje igle, pincete, skalpele, alkohol, itd do opreme, ki se uporablja pri pripravi mikrocretov, kot Mikroprepara na sebi so predstavljeni na zahteve za shranjevanje in pripravo, ki jih je treba upoštevati tudi.

Včasih je treba material za mikrokracijo fiksiran in poslikan, za katerega se uporabljajo posebne barve in objemke.

Mikropreparations se lahko pripravijo na različne načine. To je priprava oddelkov, madežev, natisov in priprava mikrokriranja živih celic organizmov (obešanje padca, zdrobljenega padca, impresita, agarnega filma) - vse to so začasne mikro. Material za njih so lahko različni deli rastlin, tkanin, mikroorganizmov.

Bibliografski seznam

1. Bavto g.a. Delavnica o anatomiji in morfologiji rastlin [Besedilo] / G.A. BAVTO, L.M. Erey. - M.: Nova izdaja, 2002. - 464С. : IL.
2. Mikrobiologija [Besedilo]: Metodična priporočila za laboratorijske razrede za biologe / študente naselja. N. V. Sharypova.- Zakon., Dopol. - Shandrinsk, 2009. - 47 s., IL.
3. Delavnica o anatomiji in morfologiji rastlin [Besedilo]: Študije. Priročnik za študije Višje. študije. Obrati / V.P. Viktorov, m.A. Gulelenkova, L.N. Dorokhina et al; Ed. L.N. Dorokhina. - M.: Akademija, 2001. - 176 str.
4. Delavnica o mikrobiologiji [Besedilo]: Študije. Priročnik za študije Višje. študije. Obrati / A.I. NETRUSOV, MA. Egorova, l.m. Zakharchuk et al.; Ed. A.I. Neturova. - M.: Akademija, 2005. - 608 str.
5. Delavnica o fiziologiji rastlin [Besedilo]: Študije. Priročnik za študije Višje. PED. študije. Institucije / I.V. Plotnikova, E.A. Zhurukhina, O.B. Mikhalevskaya et al.; Ed. Vb. Ivanova. - M.: Akademija, 2001. - 144 str.
6. Sukhanova l.v. Prenosni računalnik za laboratorijsko delo (7-8 razred) [Besedilo] / L.V. Sukhanova // 1. september: Ed. Hiša 1. septembra. - 2004. - № 25-26. - P. 36-46.
7. BARINOV OG. [Elektronski vir]. - Način dostopa:http://bio.epceptember.ru/articlef.php?id\u003d200104304.. - Naslov na zaslonu.
8. Wikipedija [elektronski vir]. - Način dostopa:http://ru.wikipedia.org/wiki/mikropreparat. - Naslov na zaslonu.
9. Metodična priporočila [elektronski vir]. - Način dostopa:http://freecode.pspo.perm.ru/080/work\u003e Priporočnost srečanja. HTM. - Naslov na zaslonu.
10. http://labx.narod.ru/documents/micropreparati.html. - Naslov na zaslonu.
11. Mikroskopska tehnika v biologiji [elektronski vir]. - Način dostopa:http://labx.narod.ru/documents/microscope_Slides.html. - Naslov na zaslonu.
12. Mikroskopska tehnika v biologiji [elektronski vir]. - Način dostopa:http://labx.narod.ru/documents/prigotovlenie_micropreparov.html. - Naslov na zaslonu.
13. Spletna stran Učitelj biologije [elektronski vir]. - Način dostopa:http://tana.ucoz.ru/load/436-1-0-354. - Naslov na zaslonu.
14. Kota Rusije. Narava Kuzbassa [elektronski vir]. - Način dostopa:http://prirodakem.narod.ru/biblioteka/my_st/doci/kl_ob.htm. - Naslov na zaslonu.
15. Podjetje "New Lyceum" [elektronski vir]. - Način dostopa:http://novylicey.narod.ru/microprep_3_5.htm - naslov na zaslonu.
16. Elektronska knjižnica Gaga (državna univerza Gorno-Altai) [elektronski vir]. - Način dostopa:http://elib.gasu.ru/eposobia/papina/malprak1/r_1_2.html. - Naslov na zaslonu.

Uporaba

Sl. 1. Ročni položaj pri proizvodnji rezanja (a) in odstranjevanje kosov iz britvice (B)

Sl. 2. Označite predmet v jedro starejšega.

Sl. 3. Priprava mikrokracije.

Pokriva objekt s premazom.

Sl. Štiri. Shema peskanja krvi

Sl. 5. Priprava zdravila

Sl. 6. Priprava brisa.

Sl. 7. "Padec za počitek": pogled na vrh in stran

Sl. 8. "Dropljenje": pogled na vrh in stran

Za pripravo začasnih mikrokratcev je potrebno imeti niz vsebinskih in premaznih kozarcev, priprava igel, britvice, skalpele, steklene palice za vodo, pinceto, filtrirni papir, nekatere reagente.

Vsebinsko in prevleko izperemo z vodo in obrišite suho z mehko krpo. Tanka rezina zelenjavnega predmeta je nameščena v kapljici vode na drsnem in pokrovom s premazom. Če tekočina na pripravku štrli preko robov pokrova stekla, se presežek odstrani s filtrirnimi papirnimi trakovi. Če voda ne pokriva celotnega območja pod steklom za premazovanje, se pipeta nanese ob robu pokritskega stekla, ki je sama po sebi narisana pod steklom.

Če je potrebno uvesti kakršno koli barvo reagenta vode iz naslovnice, sesanje s filtrirnim papirjem, in kapljice reagenta se nanese na nasprotni strani do roba stekla za premazovanje.

Naslednje snovi so lahko barvni reagenti:

1) jod, raztopljen v kalijevem jodidu (za škrobnega škroba v celicah);

2) klor-cink-jod (za membrane celuloze obarvanja celuloze);

3) floroglicina in klorovodikova kislina (za obarvanje škornih školjk);

4) fuchsin (za barvo citoplazme);

5) hematoksilin (za barvanje jedle);

6) glicerin (za razsvetljenje zdravila).

Celica - glavna strukturna in funkcionalna enota telesa rastline. Na enoceličnih rastlinah, celic deluje kot celega organizma, v večceličnih organizmih, se razlikuje celic. Zato so velikosti, oblika in struktura celic v takih organizmih zelo raznolika. Odrasla živa rastlinska celica je sestavljena iz protoplasta, obdana z mobilno lupino in vsebuje nestanovanjske vključke (rezervne snovi in \u200b\u200bkončne izdelke presnove).

Protoplast- V živo vsebina celice je sestavljena iz organoidov ali organele, obdan z hialoplazmo. Orgella. lahko razdelimo v tri skupine: dvoladeno-jedro, plastide, mitohondria; Enogrami - endoplazmični reticulum (EndoplasMic Network - EPS), naprava (kompleks) Golgi, vakuola, lizosomi, plazme; Nepogrečeni - ribosomi, mikrotubule, mikrofilamenti. Galoplazme. To je stalna koloidna celična faza, ki ima določeno viskoznost. Obkroža vse organele in zagotavlja njihovo interakcijo. Hyaloplazmo z organelami, Minus jedro in plastidi, poklicani cytoplasma..

Jedro- Obvezni del evkariontske celice. To je kraj skladiščenja in reprodukcije dednih informacij. Jedro služi tudi kot presnovni nadzorni center in skoraj vse procese, ki se pojavljajo v celici. Zunaj jedra je prekrit z dvojno membrano - jedrski plašč, ki ga prežemajo pore, na robovih, katerih zunanja membrana gre v notranji. Notranja vsebina jedra - karioplazma s kromatinom in jedmi potomijo v njej, in ribosomi.

Mitohondria. - V vseh živih evkariontskih celicah. Njihova notranja membrana oblik narašča v votlini mitohondrije v obliki plošč ali cevi, imenovanih CRISTES. Prostor med kristami je napolnjen s homogeno matriko. Matrica izpolnjuje ribosome in lastno DNK. Glavna funkcija mitohondria je zagotoviti energetske potrebe celice z dihanjem.

Ploščice- Organele, ki jih najdemo samo v rastlinski celici. Zastopajo ga kloroplasti (zelena), kromoplasti (rumena, oranžna, rdeča-oranžna) in levkoplast (brezbarvna). Kloroplasti imajo lupino z dvema svetovno. Notranja membrana gre v votlino kloroplasta z nekaj rastočih izrazov. Med rastjo je stroma. Raste in strome obrazec v votlini kompleksnega sistema kloroplasta membranskih površin, ločevanje posebnih ploskih vrečk, imenovanih tylacoids. ali lamela. Tillocoidi oblikovane skladov - graars.. V membranah tilakoidov je glavni pigment zelenih rastlin koncentriran - klorofil in pomožni pigmenti - karotenoidi.

Endoplazemski retikulum - tridimenzionalni sistem vakuolov in tubulev, ki imajo obliko ravnih vrečk ali rezervoarjev. Groba EPS je mesto sinteze beljakovin in prekrito s številnimi ribosomi. Gladka EPS je prikrajšana za ribosome in služi kot kraj oblikovanja lipidov.

Vacuool. - votline v protoplastičnih evkariontskih celicah. Vakuoli so derivati \u200b\u200bEPS, omejena membrana - tonoplast. in napolnjena z vodnimi vsebinami - celični sok. V mladih rastlinskih celicah so vakuole semicit tubul in mehurčkov (Provikoli), saj povečujejo se celice in se združijo v en večji vakuol. Zaseda 70-90% prostornine celice, protoplast pa se nahaja v obliki tanke post-glavi. Večinoma povečanje velikosti celice
Zaradi rasti vakuola. Posledično pride do pritiska na potovanje, elastičnost celic in tkiv pa se ohranja.

Celični sok To je vodna raztopina mineralnih soli in različnih organskih spojin: ogljikovih hidratov (mono-, di- in polisaharidov), beljakovine, organske kisline in njihove soli (najpogostejša limona, jabolka, jantarna kislina, oksalne kisline in njihove derivate), alkaloide ( Spojine, ki vsebujejo dušik, mnogi so rastlinski strupe, nekateri pa uporabljajo oseba - kofein, atropin, cinen, morfin, kodein), tanin (fenolni derivati), glikozide (derivati \u200b\u200bSukharova). Med slednjimi najbolj zanimiva skupina flavonoidov (to so pigmenti dveh glavnih barv: flavones - rumene in antocije - rdeče-vijolične). Najpogosteje flavonoidi so vsebovani v celicah periana iz cvetja, ki dajejo različne barve. Zanimivo je, da lahko antociani spremenijo barvo, odvisno od reakcije celičnega soka: s šibko kislino - rdeče, in z nevtralnim ali glavno-modro-vijolično. Spreminjanje barve antocianov je mogoče opaziti pri odpiranju cvetja pozabite-me-ne, meduse ali škropljenje hrapavo. Popki teh rastlin so rožnate bele, in zamegljeni cvetovi so modri ali vijolični. Poleg antocijskih listov je lahko vsebovana v drugih delih rastlin - listov, stebla, korenin, ki jim dajejo značilno barvo.

Stroj golgi. Sestoji iz ločenih Docyomes in Golgi mehurčkov. DOKIOSOMES so skladišču ploščatih, brezkontaktnih diskastih rezervoarjev za lase, omejene z membranami. Golgi mehurčki so naveden iz robov nerodnih plošč ali koncev cevi in \u200b\u200bso usmerjeni proti plazmamami ali vakuole. Golgi Bubbles prevažajo nastale polisaharide.

Laboratorijska številka 1

Zadeva: "Kuhanje in opis mikrofretov celic različnih organizmov."

Namen dela: Zaščitite možnost priprave mikroscapsov in si jih ogledati pod mikroskopom, poiščite značilnosti strukture celic različnih organizmov, lastno temo terminologijo.

Oprema:kožne lestvice žarnic, človeških ustnih epitelnih celic, kulture s tere, steklo z vodo, mikroskopom, čaj žlico, pokrov in diapozitivo, modro črnilo, jod, mikro-molza živalske celice, prenosni računalnik, ročaj, preprost svinčnik, linija,

Napredek:

Delo 1.

1. Razmislite na številki zaporedje priprave utripov lupine.
2. Pripravite steklo iz stekla, temeljito vtrite ga Gaze.
3. Pipeta nanesite 1-2 kapljic vode na diapozitivu.
4. S pomočjo vakuične igle previdno odstranite majhen kos prozorne kože z notranje površine lestvice loka. Postavite kos lupine v kapljico vode in poravnajte konico iglo.
5. Pokrijte kožo s pokritim steklom, kot je prikazano na sliki.
6. Upoštevajte pripravljeno zdravilo pri majhnem povečanju. Označite, kateri deli celice, ki jih vidite.
7. Obarvajte zdravilo z raztopino joda. V ta namen uporabite raztopino joda na drsnem steklu. Filtrirni papir na drugi strani izvlecite dodatno rešitev.
8. Razmislite o pobarvanem zdravilu. Kakšne spremembe so se pojavile?

9. Upoštevajte drogo z velikim povečanjem. Poiščite kloroplasti na njem v listih celicah, temnem traku, okoliškem celici, lupini; Pod tem je zlata snov citoplazma (lahko zasede celotno celico ali pa je blizu stene). V citoplazmi je jedro jasno vidno. Poiščite vakularni sok (se razlikuje od citoplazme barve).

10. Narišite 2-3 celice obleke loka. Označite lupino, citoplazmo, jedro, vakuol s celičnim sokom.
V citoplazma rastlinske celice obstajajo številne majhne zgodbe - PLASTS. Z veliko povečavo so jasno vidne. V celicah različnih organov je število plastidov drugače.
V plastičnih napravah je lahko različnih barv: zelena, rumena ali oranžna in brezbarvna. V celicah kožne tehtnice, na primer, plastika so brezbarvna.

Delo 2.

1. Pripravite bakterije sena.

2. Razmislite o drogah pod mikroskopom.

3. Razmislite o pripravljenih mikroflatov celic multiceličnega živalskega organizma.

4. Suspenzija, ki jo vidimo s podobo predmeta na sliki.

Delo 3.

1. 
   Razmislite o pripravljenih mikroferenčnih mikroferenčnih mizjih večceličnih živalskih celic.
2. 
   Ujemanje s sliko predmeta na sliki.

3. Navedite celice celice, prikazane na sl. štiri

Laboratorijska dela številka 2

Zadeva: "Opazovanje fenomena plazmolize in deplosize"

Namen:poskrbite, da obstaja pojav plazmolize in deplosize v živih rastlinskih celicah in hitrost fizioloških procesov.

Oprema: Mikroskopi, predmetni in premazni kozarci, steklenice, vodna očala, filtrirni papir, slana sol, čebula.

Napredek

1. 
   Odstranite spodnjo kožo lestvice loka (4 mm 2);
2. 
   Pripravite mikrofrekvenco, upoštevajte in skicirate 4-5 celice;
3. 
   Na eni strani pokrova stekla nanesite nekaj kapljic raztopine tabele soli, po drugi strani pa potegnite vodo s trakom filtrirnega papirja;
4. 
   Razmislite o mikro-proces v nekaj sekundah. Bodite pozorni na spremembe, ki se je zgodila s celičnimi membranami in čas, za katerega so se pojavile te spremembe. Narišite spremenjen predmet.
5. 
   Na robu pokrovnega stekla nanesite nekaj kapljic destilirane vode in ga izvlecite na drugi strani s filtrirnim papirjem, splakovanje raztopine plazmolize.
6. 
   Za nekaj minut razmislite o mikroskopu pod mikroskopom. Upoštevajte spremembe v položaju celičnih membran in čas, za katerega so se pojavile te spremembe.
7. 
   Ujemanje s podobo predmeta na sliki 1.
8. 
   Narišite preučeni predmet.
9. 
   Zaključek v skladu z namenom dela, ki opazuje hitrost plazmolize in deplosize. Pojasnite razliko v hitrosti teh dveh procesov.

Odgovori na vprašanja:

1. Kje se je voda premaknila (v celicah ali od njih) pri dajanju tkiva v raztopino soli?

2. Zakaj lahko razložite smer gibanja vode?

3. Kje se je voda premaknila pri dajanju tkanine v vodo? Kaj je to razloženo?

4. Kaj menite, da se bo zgodilo v celicah, če bi dolgo časa zapustili v trdni raztopini?

5. Ali lahko uporabim raztopino soli za uničenje plevela?

6. Dajte opredelitev terminatov - plasmoliz, defosmoliz, osmoza, Turgor.
7. Pojasnite, zakaj so jabolka manj sočna v marmelatu?

Slika 1. Plazmoliza in deplosmoliza

Laboratorijska številka 3

Zadeva: "Primerjava strukture rastlin in živalskih celic, gob, bakterij."

Namen:naučite se značilnosti strukture celic različnih organizmov, jih primerjajte med seboj; Lastno temo terminologijo.

Oprema:mikroskopi, predmeta in prevlečna stekla, kozarci z vodo, steklenimi palicami, listje slonov, kvas, kultura s temi, mikro-molžnih mikro-celic.

Delo 1.

1. Pripravite zdravilo iz listov Eldina. Če želite to narediti, ločite list iz stebla, ga položite v kapljico vode na drsenje in pokrijete pokrivno steklo.
2. Razmislite o pripravku pod mikroskopom. Poiščite kloroplasti v celicah.
3. Narišite strukturo celice eldine. Nanesite napise na vašo risbo. 4.Reat Slika 1. Upoštevajte obliko, velikosti celic različni organi rastlin

Sl. 1. Barva, oblika in velikost celic različnih organov rastlin

Delo 2.

1. Odrežite čaj žlico malo sluzi iz notranjosti obraza. 2. Postavite sluz na diapozitiv in sun modri črnilo razredčimo v vodi. Pokrijte pripravo s steklom za premazovanje. 3. Razmislite o zdravilu pod mikroskopom.

Delo 3.

1. 
   Upoštevajte dokončane mikro celice celic multiceličnega živalskega organizma.

2. Ujemanje v lekciji s podobo predmetov na tabelah.

1. 
   Primerjajte te celice med njimi.
2. 
   Rezultati primerjave Vnesite tabelo 1

Odgovori na vprašanja:

• 
  Kakšna je podobnost in razlika celic?
• 
  Kakšni so razlogi za podobnosti in razlike v celicah različnih organizmov?

Praktično delo

Predmet : "Priprava najenostavnejših shem prehoda."

Namen: Naučite se napišeti vrste uteži, ki jih oblikujejo organizmi z določenimi genotipi; Na kratko zabeležite stanje genetskih nalog; Rešite težave s situacijo v genetiki; Uporabite genetske terminološke veščine.

Oprema: Vadnica, prenosni računalnik, pogoji nalog, ročaj.

Napredek:

Vaja 1.

Napišite vse vrste uteži, ki jih oblikujejo organizmi, ki imajo naslednje genotipe: AABB, AA, MMPP, PPKK, AABBCC, AABBCCPP, AABBCC.

S pisanjem gametov je treba spomniti, da je telo homozigotno (AA) ali več (AABBCC) genov, vsi izstopi so enaki za te gene, saj nosijo isti alele.

V primeru heterozivikotnosti, en gen (AA), telo tvori dve vrsti območij, ki prevažajo različne alele. Digneterozigous organizem (AAVB) tvori štiri vrste uteži. Na splošno telo oblikuje več vrst HEMETS kot pri večjemu številu genov, ki jih je heterosigoten. Skupno število vrst uteži je 2 do stopnje N, kjer je n število genov v heterozigovem stanju. Z zapisovanjem gametov je treba voditi po pravu "čistoče" iger, v skladu s katerimi vsaka gameta nosi enega od vsakega para genov alela.

Naloga 2.

Naučite se na kratko zabeležiti stanje genetskega problema in njegove rešitve.

S kratkim zapisom, pogoji genskega problema, prevladujoča funkcija označena (a), in recesivno - male črke (a) pismo z oznako ustrezne funkcije. Genotip telesa, ki ima prevladujočega znaka, brez dodatnih navodil na njegovo homo- ali heterozygment v stanju problema, je označen z A?, Kjer vprašanje odraža potrebo po vzpostavitvi genotipa med rešitvijo problema. Genotip organizma z recesivnimi znaki je vedno homozigoten na recesivnem alelu - AA. Simptomi, ki se držijo na tleh, so označeni v primeru X - vezane dediščine kot Xª ali HA

Primer kratkih rekordov in rešitev

Nalogo. Pri ljudeh je vloga barvnega očesa Karela dominira nad modro barvo. Modro oči se poroči z heterozigotnim moškega. Kakšna je barva oči?

Povzetek povzetkov Povzetek

A - Karya Eye Barva starši - P AA X AA

A - modra barva oči Gameta - G A, in

Starši: AA X AA Offspring - F aa aa

Potomci? Karya Barva modra barva

Naloga 3.

Na kratko posnemite stanje genetskega problema in njegovo rešitev.

Naloga: Računovodstvo MyOpia dominira normalno vid. Otrok z običajnim vidom je bil rojen iz Myntic staršev. Kaj je genotip staršev? Kateri drugi otroci so lahko iz te poroke?

Praktično delo

Predmet : "Raztopina genetskih nalog."

Namen: Naučite se rešiti genetske naloge; pojasnite učinek zunanjih dejavnikov na manifestacijo lastnosti; Uporabite genetske terminološke spretnosti.

Oprema: vaje, prenosni računalnik, pogoji nalog, ročaj.

Napredek:

1. Spomnimo osnovne zakonodaje dedovanja znakov.

2. Kolektivna analiza nalog na monohidridu in dignebdnem prehodu.

3. Neodvisna rešitev problemov na mono-liberdu in digibridnem križišču, ki podrobno opisuje potek rešitve in oblikuje popoln odgovor.

4. Kolektivna razprava o reševanju nalog med študenti in učiteljem.

5. Izdelajte izhod.

Naloge za prehod mono-liber

Naloga št. 1. V govedu, gen, ki povzroča črno volno, dominira genom, ki določa rdečo barvo. Kakšen potomci lahko pričakujemo od prehoda homozigotnega črnega bika in rdeče krave?

Rešitev za to nalogo bomo analizirali. Sprva uvajamo zapis. V genih za gene so bili sprejeti abecedni simboli: Dominantni geni označujejo z velikimi črkami, recesivno - linijo. Prevladuje črni barvni gen, zato je označen z A. Men Red Coloring Wool Recesive - a. Zato bo genotip črnega homozigotnega bika AA. Kaj je genotip rdeče krave? Ima recesivni znak, ki lahko manifestira fenotipsko v homozigotni državi (organizem). Tako genotip aa. Če je bil v genotipu krave vsaj en prevladujoči gen A, potem ne bi imel rdeče volne. Zdaj, ko so določeni genotipi starševskih posameznikov, je treba pripraviti shemo teoretičnega prehoda

Črni bik tvori eno vrsto uteži v skladu z resničnimi - vse genitalne celice bodo vsebovale samo gen A. Za udobje štetja, pišemo le vrste uteži in ne vseh spolnih celic te živali. Homozigotna krava ima tudi eno vrsto iger - a. Pri združitvi takih iger, enega, edini genotip - AA, i.e. Vsi potomci bodo enotno in bodo imeli znak starša, ki ima prevladujoči fenotip - črni bik.

Tako lahko zapišete naslednji odgovor: Pri prehodu homozigotnega črnega bika in rdeče krave v potomcih morate pričakovati le črne heterozigotne teleta

Naslednje naloge je treba rešiti na lastno, opisujejo podrobno potek rešitve in oblikovati popoln odgovor.

Naloga # 2. Kateri potomci lahko pričakujemo od prehoda krave in bika, heterozigotne volne slike?

Naloga # 3. V morski prašički se vrtilna volna določi s prevladujočim genomom in gladko - recesivno.

1. Prečkanje dveh vrtincev med seboj je dalo 39 posameznikov s volno volno in 11 gladkimi živalskimi živalmi. Koliko posameznikov, ki imajo prevladujoči fenotip, bi moral biti homozigoten na tej podlagi?

2. Vodni prašič z vrtinčno volno pri prehodu z osebo z gladko volno, ki je naveden v potomcih 28 vrtinkov in 26 gladkih potomcev. Določite genotipe staršev in potomcev.

Naloge za di- in poligibriški prehod

Številka opravila 7. Napišite gamete organizmov z naslednjimi genotipi: Aava; AABB; Aai; Aava; Aava; AABB; AAV; AAVVS; Aajs; AAVSS; AAVSS.

Analizirali bomo enega od primerov. Pri reševanju takih nalog je treba voditi po pravu čistosti iger: Gameta genetsko očiščena, saj se samo en gen iz vsakega alelskega para pade v to. Vzemite na primer osebo z genotipom AAVBS. Od prvega para genov - parov a - v vsaki spolni celici pade v proces meioze ali gena a ali gen a. V istih igrah iz par genov, ki se nahaja v drugem kromosomu, se vnese gen v ali B. Tretja para je tudi v vsaki spolni celici, ki oskrbuje dominantni gen z ali njegovim recesivnim alelom - s. Tako lahko Gameta vsebuje vse dominantne gene - ABC ali Recesive - ABC, kot tudi njihove kombinacije: ABC, ABC, ABE, ABC, ABC in BS.

Da se ne sme zamenjati v količini nepovratnih sredstev, ki jih je telo oblikovalo s preučenim genotipom, je mogoče uporabiti formulo n \u003d 2N, kjer je n število vrst iger, in n je število heterozigotnih parov geni. V pravilnosti te formule je enostavno preveriti primere: heterozygotaaa ima en heterozigotni par; Posledično, n \u003d 21 \u003d 2. Obračuje dve razredi: a in a. DIGETOSIGOTAAVOVAVO vsebuje dva heterozigota para: n \u003d 22 \u003d 4, štiri vrste iger se oblikujejo: AB, AB, AB, AB. Trigosigotaahavs v skladu s tem morajo oblikovati 8 sort genitalnih celic n \u003d 23 \u003d 8), ki so že izpuščeni zgoraj.

Številka opravila 8. Pri govedu se gen vrtnice prevladuje nad genomom višine, gen za črno plašč pa je nad rdečim genom barve. Oba para genov sta v različnih parih kromosomov.

1. Kaj so teleta, če smo prečkali heterozigoto na obeh parih

Znaki bika in krave?

2. Kakšen potomci naj bi pričakovali od prečkanja črnega komolnega bika, heterozigotnega na obeh parih znakov, z rdečo rogovi kravo?

Dodatne naloge za laboratorijsko delo

Naloga # 1. Na Belliferma je bila pridobljena razpon od 225 martov. Od teh, 167 živali ima rjavo krzno in 58 mink modro-sivo barvo. Določite genotipe izvornih obrazcev, če je znano, da rjavi barvni gen dominira v genomu, ki določa modro-sivo barvo volne.

Naloga # 2. Oseba ima rjavo oko dominira v genomu zaradi modre oči. Blue-Eyed Man, eden od staršev, katerih starši so imela rjave oči, se je poročila kot karbohilazna ženska, ki je imela oče rjave oči, mama pa je bila modra. Kakšen potomci lahko pričakujete od te poroke?

Naloga # 3. Albinizem je podedovan pri ljudeh kot recesivni znak. V družini, kjer ima eden od zakoncev Albino in drugega pigmentiranih las, sta dva otroka. En otrok Albino, drugo - s poslikanimi lasmi. Kakšna je verjetnost rojstva naslednjega otroka-albino?

Naloga številka 4. Pri psih črna barva volne dominira kavo in kratko volno - dolgo. Oba para genov sta v različnih kromosomih.

1. Kateri odstotek črnih kratkoročnih mladičkov se lahko pričakuje od prečkanja dveh posameznikov, heterozigotnih na obeh razlogih?

2. Hunter je kupil črnega psa s kratko volno in želi biti prepričan, da ne nosi genov dolge kavne volne. Kateri partner v fenotipu in genotipu je treba izbrati za prehod, da preveri genotip kupljenega psa?

Številka opravil 5. Človeški, človeški eye Gen dominira v genom, ki določa razvoj modrega očesa, in gen, ki povzroča zmožnost boljše lastne desne roke, prevladuje nad genom, ki določa razvoj levičarstva. Oba para genov se nahajata v različnih kromosomih. Kaj bi lahko bili otroci, če so njihovi starši heterozigotni?

Naloga številka 6. Oseba ima recesiven gen in zazna nedolžne gluhost. Dedni gluhi in neumni človek se je poročil z žensko, ki ima normalne govorice. Ali je mogoče določiti genotip matere otroka?

Naloga številka 7. Iz rumenega semena graha je bila pridobljena rastlina, ki je dala 215 semen, od tega 165 rumenih in 50 zelenih. Kakšni so genotipi vseh oblik?

Naloga številka 8. Oče in mama je čutila grenko okus feniltioma. Dva od štirih otrok ne čutita okusa tega zdravila. Prevzemanje, da so razlike v občutljivosti na feniltiomo-neodvisno enotogen, določajo prevladujočo ali recesivno neobčutljivost na feniltiomoopevin.